本教材不僅包含獨立的生物化學(xué)實驗項目，如蛋白質(zhì)濃度測定、核酸的鑒定及濃度測定、聚丙烯酰胺凝膠電泳等，包含了各類生物大分子的定性鑒定和定量測定，適合于一般高等學(xué)校的本科生開設(shè)基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗；在此基礎(chǔ)上，還包含了多個綜合性實驗項目，如大豆胰蛋白酶抑制劑的分離純化及性質(zhì)測定、殼聚糖固定化蚯蚓纖溶酶及性質(zhì)測定等。本書在綜合性實驗項目中，將多數(shù)生物化學(xué)研究技術(shù)綜合在一起，有利于為重點高等學(xué)校的學(xué)生開設(shè)現(xiàn)代生物化學(xué)實驗課，因此本教材具有較多的適用對象。
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目錄
前言
第一篇 實驗要求
第一章 生物化學(xué)實驗基本要求 1
第一節(jié) 生化實驗室學(xué)生實驗守則 1
第二節(jié) 實驗室安全及防護知識 1
第三節(jié) 生物化學(xué)實驗報告 3
第二篇 實驗技術(shù)原理與基礎(chǔ)實驗
第二章 生物物質(zhì)的定性鑒定 7
第一節(jié) 氨基酸和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及性質(zhì) 7
第二節(jié) 核酸的結(jié)構(gòu)組成特點 10
第三節(jié) 糖的基本性質(zhì) 12
第四節(jié) 酶的催化特性 13
第五節(jié) 實驗部分 15
實驗一 蛋白質(zhì)的雙縮脲反應(yīng) 15
實驗二 蛋白質(zhì)和氨基酸的茚三酮反應(yīng) 17
實驗三 蛋白質(zhì)的黃色反應(yīng) 19
實驗四 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng) 20
實驗五 蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)及等電點的測定 24
實驗六 酵母RNA的提取與鑒定 26
實驗七 糖的呈色反應(yīng)及還原糖的檢測 29
實驗八 淀粉酶的激活劑抑制劑及其特異性分析 33
實驗九 肌糖原的酵解作用研究 36
實驗十 生物氧化作用研究 38
第三章 紙層析技術(shù) 42
第一節(jié) 紙層析基本原理 42
第二節(jié) 影響相對遷移率的主要因素 43
第三節(jié) 實驗部分 45
實驗一 氨基酸的紙層析分離 45
實驗二 紙層析法檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性 47
第四章 薄層層析技術(shù) 50
第一節(jié) 薄層層析原理 50
第二節(jié) 固定相支持介質(zhì)的選擇 51
第三節(jié) 實驗部分 53
實驗一 硅膠薄層層析法分離鑒定水果中的糖類物質(zhì) 53
實驗二 DEAE-纖維素薄層層析分離鑒定核苷酸 55
第五章 離子交換層析技術(shù) 58
第一節(jié) 離子交換層析原理 58
第二節(jié) 核酸蛋白質(zhì)檢測儀的構(gòu)造及使用 63
第三節(jié) 實驗部分 64
實驗一 離子交換法制備無離子水 64
實驗二 DEAE-Cellulose柱層析分離純化大蒜超氧化物歧化酶 67
第六章 凝膠過濾層析技術(shù) 72
第一節(jié) 凝膠過濾層析原理 72
第二節(jié) 實驗部分 78
實驗一 分子篩過濾層析脫鹽 78
實驗二 分子篩層析法分離蛋白質(zhì)及相對分子質(zhì)量測定 80
第七章 親和層析技術(shù) 84
第八章 離心技術(shù) 89
第九章 分光光度技術(shù) 94
第一節(jié) 分光光度技術(shù)的原理 94
第二節(jié) 分光光度計的構(gòu)造及使用 97
第三節(jié) 實驗部分 100
實驗一 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量 100
實驗二 Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)濃度 102
實驗三 紫外吸收法測定蚯蚓提取液的蛋白質(zhì)含量 104
實驗四 考馬斯亮藍染色法測定蛋白質(zhì)濃度 106
實驗五 花椰菜DNA的提取與二苯胺法測定DNA的含量 108
實驗六 植物組織中可溶性糖含量的測定（蒽酮比色法） 111
實驗七 兔肝轉(zhuǎn)氨酶活力測定 113
實驗八 酵母發(fā)酵過程中無機磷的利用（定磷法） 116
第十章 電泳技術(shù) 119
第一節(jié) 電泳的基本原理 119
第二節(jié) 電泳的分類 121
第三節(jié) 常用的電泳技術(shù) 122
第四節(jié) 染色方法 133
第五節(jié) 電泳有關(guān)的儀器及使用 135
第六節(jié) 實驗部分 137
實驗一 醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白 137
實驗二 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離大蒜超氧化物歧化酶 139
實驗三 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定超氧化物歧化酶的相對分子質(zhì)量 143
實驗四 等電聚焦電泳法測定雞卵類黏蛋白的等電點 146
第十一章 蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù) 149
第一節(jié) 蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)原理 149
第二節(jié) 抗血清的制備 153
第十二章 滴定技術(shù) 159
第一節(jié) 概述 159
第二節(jié) 實驗部分 160
實驗一 溫度、pH對糖化酶活力的影響 160
實驗二 果蔬中維生素5的定量測定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 163
第三篇 綜合性實驗
十三章 實驗舉例 167
實驗一 微量凱氏定氮法測定牛奶蛋白質(zhì)含量 167
實驗二 雞卵類黏蛋白的分離純化活性及相對分子質(zhì)量測定 172
實驗三 蛋白質(zhì)免疫印跡檢測小鼠肝臟脾臟及血液超氧化物歧化酶 179
實驗四 胰蛋白酶米氏常數(shù)及最大反應(yīng)速度的測定 183
實驗五 胰蛋白酶的固定化及其性質(zhì) 186
實驗六 親和層析純化蚯蚓絲氨酸蛋白酶 191
實驗七 植物過氧化物同工酶提取活性測定及電泳鑒定 196
實驗八 大豆多糖的提取及測定 199
實驗九 定磷法測定酵母核糖核酸的含量 203
實驗十 小鼠肝臟DNA的提取及測定 207
實驗十一 兔肝總RNA的提取及R-PCR 210
參考文獻 215
附錄一 常用標準溶液的配制和標定 216
附錄二 常用緩沖液的配制方法 220
附錄三 硫酸銨飽和度的調(diào)整用表 225
附錄四 柱層析材料 227
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