《生物工程基礎實驗指導》主要介紹生物工程主要專業(yè)實驗課程的基本操作技術與實驗手段，包括生物化學實驗、分子生物學實驗、基因工程實驗、酶與蛋白質工程實驗、發(fā)酵工程實驗、生物分離工程實驗等。該書將各相關實驗與其對應的理論課程有機結合起來，形成既具有一定理論體系又具有一定通用性和指導性的教學實驗用書，強調對實驗結果的分析與討論，引導學生通過查閱文獻資料來對比和驗證實驗結果，及時反思和分析既有的實驗方案和思路，有利于培養(yǎng)學生在實驗中的嚴謹性和規(guī)范性，充分激發(fā)和培養(yǎng)學生的獨立思考能力、創(chuàng)新能力以及“存疑”和“求異”精神。
第一章 常用儀器設備及使用 001
一、PCR 儀的原理及使用方法 001
二、臺式離心機的使用 003
三、分光光度計原理及使用 005
四、自動核酸蛋白分離色譜儀 008
五、電泳儀的使用 011
六、凝膠成像系統(tǒng)的使用 017
七、旋轉蒸發(fā)器的使用 018
八、索氏提取器 020
九、微波-超聲波合成萃取儀 021
十、氣相色譜-質譜聯(lián)用儀 023
十一、BT 系列蠕動泵 025
第二章 生物化學實驗 028
實驗一 甲醛滴定法 028
實驗二 糖的定量：3,5-二硝基水楊酸比色法 030
實驗三 植物組織中可溶性總糖的測定 033
實驗四 血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳 035
實驗五 蛋白質的沉淀反應 037
實驗六 肝臟谷丙轉氨酶活力測定 038
實驗七 維生素C 的定量測定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 041
實驗八 粗脂肪提取和含量測定 043
實驗九 動物組織中脫氧核糖核酸的制備及測定 045
第三章 分子生物學實驗 048
實驗一 DNA 的瓊脂糖凝膠電泳 048
實驗二 紫外分光光度法分析DNA 濃度與純度 050
實驗三 CTAB 法提取植物基因組DNA 052
實驗四 SDS 法提取植物基因組 DNA 053
實驗五 大腸桿菌基因組DNA 的提取 055
實驗六 綠色熒光蛋白基因的PCR 擴增 057
實驗七 硅膠膜吸附法純化DNA 片段 060
第四章 基因工程實驗 062
實驗一 質粒DNA 的提取與檢測 062
實驗二 質粒DNA 的酶切反應 067
實驗三 瓊脂糖凝膠電泳回收DNA 片段 070
實驗四 目的DNA 片段與載體的連接反應 072
實驗五 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備 076
實驗六 大腸桿菌感受態(tài)細胞的轉化 079
實驗七 陽性克隆的篩選和鑒定 082
實驗八 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達 085
實驗九 SDS-PAGE 檢測表達蛋白 089
第五章 酶與蛋白質工程實驗 094
實驗一 過氧化氫酶活性的測定 094
實驗二 淀粉酶的提取和活性測定 096
實驗三 膽綠素還原酶的修飾與活性基團鑒定 099
實驗四 殼聚糖微球固定化木瓜蛋白酶 100
實驗五 溶菌酶的制備及活力測定 103
實驗六 酶法澄清蘋果汁加工工藝優(yōu)化 105
實驗七 酵母細胞固定化 106
實驗八 pH 對酶活力的影響——最適pH 的測定 108
實驗九 溫度對酶活力的影響——最適溫度的測定 110
實驗十 酵母中蔗糖酶的提取及活性測定 112
第六章 發(fā)酵工程實驗 115
實驗一 自然界中發(fā)酵菌株的分離 115
實驗二 淀粉酶發(fā)酵菌種的初篩 117
實驗三 液化型淀粉酶活力的測定 118
實驗四 液化型淀粉酶發(fā)酵菌種的紫外誘變育種 121
實驗五 發(fā)酵菌種的復壯和保藏 122
實驗六 正交實驗法優(yōu)化生產菌株發(fā)酵培養(yǎng)基的配方 124
實驗七 生長曲線和產物形成曲線的測定 126
第七章 生物分離工程實驗 129
實驗一 牛乳中酪蛋白的提取及含量測定 129
實驗二 維生素A 的提取及含量測定 132
實驗三 大蒜細胞SOD 酶的提取與分離 136
實驗四 香菇多糖的提取、純化及含量測定 141
實驗五 離子交換樹脂總交換容量的測定 143
實驗六 離子交換柱色譜分離混合氨基酸 148
實驗七 PEG/硫酸鹽雙水相系統(tǒng)相圖制作 152
實驗八 PEG/(NH4)2SO4 系統(tǒng)中蛋白質分配系數(shù)測定 154
實驗九 胰蛋白酶的提取與激活 158
實驗十 胰蛋白酶的酶活和比活測定 161
實驗十一 反膠束萃取技術提取胰蛋白酶 164
附錄一 常用堿基符號 168
附錄二 常用氨基酸符號 169
附錄三 常用緩沖液的配制 170
附錄四 常用上樣緩沖液配制 173
附錄五 常用電泳緩沖液的配制 174
附錄六 常用試劑的配制 175
附錄七 常用緩沖液母液或儲存液 178
附錄八 常用抗生素 179
附錄九 硫酸銨飽和度計算及加入方式 180
參考文獻 182
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