目錄
生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)須知 1
第一部分 實(shí)驗(yàn)基本操作
第一章 玻璃儀器洗滌與清潔 3
第二章 吸量器的選擇與使用 5
第三章 溶液的處理 8
第四章 實(shí)驗(yàn)樣品的制備 9
第五章 實(shí)驗(yàn)儀器介紹 11
第六章 實(shí)驗(yàn)報(bào)告撰寫及要求 21
第二部分 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)
第七章 分光光度法 22
概述 22
實(shí)驗(yàn)1 紫外分光光度法測定核酸與蛋白質(zhì)含量 25
實(shí)驗(yàn)2 血清蛋白的鹽析與定量 27
實(shí)驗(yàn)3 Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量（Lowry基本法） 28
第八章 層析法 31
概述 31
實(shí)驗(yàn)4 紙層析法分析轉(zhuǎn)氨基反應(yīng) 38
實(shí)驗(yàn)5 離子交換柱層析法分離血清蛋白 40
第九章 電泳法 44
概述 44
實(shí)驗(yàn)6 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離混合蛋白質(zhì) 49
第十章 離心分離技術(shù) 53
概述 53
實(shí)驗(yàn)7 單個(gè)核細(xì)胞的分離——密度梯度離心法分離淋巴細(xì)胞 54
第十一章 酶促反應(yīng)動力學(xué)實(shí)驗(yàn)56
實(shí)驗(yàn)8 用正交法測定幾種因素對酶活力的影響 56
實(shí)驗(yàn)9 影響酶活性的因素 59
實(shí)驗(yàn)10 堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定 61
第三部分 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)
第十二章 基因工程基本技術(shù) 65
概述 65
實(shí)驗(yàn)11 大腸桿菌感受態(tài)的制備及質(zhì)粒轉(zhuǎn)化 66
實(shí)驗(yàn)12 質(zhì)粒DNA提取、濃度測定與純度鑒定 68
實(shí)驗(yàn)13 重組質(zhì)粒DNA的酶切鑒定 70
實(shí)驗(yàn)14 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增基因 72
實(shí)驗(yàn)15 動物組織總RNA的提取 75
實(shí)驗(yàn)16 RNA質(zhì)量檢測及cDNA鏈合成 77
實(shí)驗(yàn)17 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物純化及瓊脂糖凝膠電泳回收 79
實(shí)驗(yàn)18 DNA限制性內(nèi)切酶酶切和酶切產(chǎn)物的回收 81
實(shí)驗(yàn)19 目的基因與質(zhì)粒載體的連接和轉(zhuǎn)化 83
實(shí)驗(yàn)20 陽性克隆的篩選與鑒定 85
實(shí)驗(yàn)21 外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)與檢測 87
第十三章 基因表達(dá)與功能分析的基本方法 90
實(shí)驗(yàn)22 實(shí)時(shí)定量PCR 90
實(shí)驗(yàn)23 Westernblot檢測目標(biāo)蛋白的表達(dá) 93
實(shí)驗(yàn)24 免疫共沉淀（Co-IP）研究蛋白質(zhì)相互作用 98
實(shí)驗(yàn)25 染色質(zhì)免疫沉淀法（ChIP）研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA的相互作用 102
第十四章 臨床生物化學(xué)與臨床分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 108
實(shí)驗(yàn)26 堿性磷酸酶的提取和比活性測定 108
實(shí)驗(yàn)27 正常和糖尿病大鼠血糖與血脂的檢測及激素對血糖的影響 111
實(shí)驗(yàn)28 人頰黏膜上皮細(xì)胞基因組DNA的抽提及ACE基因多態(tài)性檢測 115
實(shí)驗(yàn)29 乙醛脫氫酶突變基因型的檢測 117
實(shí)驗(yàn)30 人血清同型半胱氨酸的測定 119