目錄
Contents
前言
實驗室規(guī)則
細胞生物學實驗繪圖方法與要求
第一部分 基礎性實驗 1
實驗1 普通顯微鏡及其使用 1
實驗2 特殊顯微鏡及其使用 6
實驗3 石蠟切片法制備光學顯微標本 15
實驗4 冰凍切片法制備光學顯微標本 21
實驗5 透射電子顯微鏡及樣品制備 24
實驗6 掃描電子顯微鏡及樣品制備 29
實驗7 細胞形態(tài)觀察、大小測量和死活細胞鑒定 32
實驗8 液泡系的超活染色與動態(tài)觀察 34
實驗9 線粒體超活染色技術(shù)與數(shù)目統(tǒng)計 36
實驗10 細胞骨架觀察——微絲觀察 37
實驗11 細胞骨架觀察——微管觀察 40
實驗12 堿性磷酸酶和酸性磷酸酶染色技術(shù) 42
實驗13 核仁組織區(qū)銀染色技術(shù)(Ag-Nor染色法) 44
實驗14 多糖的細胞化學顯示法——PAS反應 46
實驗15 DNA的細胞化學顯示法——Feulgen反應 50
實驗16 RNA的細胞化學顯示法——Brachet反應 51
實驗17 細胞器的分離與鑒定 53
實驗18 動物細胞基因DNA組提取 56
實驗19 植物細胞基因組DNA提取 58
實驗20 釀酒酵母RNA提取 61
實驗21 細胞無絲分裂和有絲分裂的形態(tài)觀察 63
實驗22 細胞減數(shù)分裂的形態(tài)觀察 65
實驗23 超前凝集染色體標本的制備與觀察 69
實驗24 細胞的原代培養(yǎng) 71
實驗25 細胞的傳代培養(yǎng) 74
實驗26 細胞融合 76
實驗27 流式細胞儀測定細胞DNA含量 77
第二部分 綜合性實驗 81
實驗28 熒光原位雜交確定特定核酸序列的定位 81
實驗29 磷酸鈣沉淀法將DNA導入細胞 84
實驗30 RT-PCR檢測水稻肌動蛋白基因的表達 86
實驗31 Western-Blot檢測HeLa細胞HSP70表達 89
實驗32 重組GFP在洋蔥細胞中瞬時表達的觀察(基因槍導入法) 94
實驗33 蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用檢測——酵母雙雜交篩選 95
第三部分 設計性實驗 103
實驗34 不同類群細胞大小和結(jié)構(gòu)的比較 103
實驗35 植物細胞中葉綠體的原位觀察 106
實驗36 不同方法制備同步化細胞的效果比較 108
實驗37 細胞凋亡的誘導和檢測 111
附錄 117
附錄一 離心機轉(zhuǎn)數(shù)與離心力的換算表 117
附錄二 常用溶液的配制和使用 118
附錄三 生物標本常用染料性能簡介 130
附錄四 常用玻璃、塑料儀器的清洗和干燥 133
附錄五 常用單位 135
附錄六 藥品規(guī)格 136
參考文獻 137