形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
定 價(jià)：23.5 元
叢書名：國家“十一五”重點(diǎn)圖書·現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)科研技術(shù)叢書
- 作者：趙熒
- 出版時(shí)間：2008/9/1
- ISBN：9787811160758
- 出 版 社：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社
- 中圖法分類：R32-33
- 頁碼：294
- 紙張：膠紙板
- 版次：1
- 開本：大32開
有位前輩曾說過：一名合格的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備聽、說、讀、寫、思五項(xiàng)能力。聽，聽他人的實(shí)驗(yàn)思路、實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，以充實(shí)自身的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)；說，多與他人交流，在交流中捕捉靈感，豐滿與糾正實(shí)驗(yàn)過程；讀，博覽全書，閱讀文獻(xiàn)著作，積累素材，優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案；寫，手要勤，隨時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)感受與疑惑，尋找解決疑惑的途徑；思，則最為重要，實(shí)驗(yàn)中存在一些不確定性因素，勤于思考，設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)周密的實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線，隨時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)流程與操作。
在當(dāng)今生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，由于新技術(shù)、新方法的層出不窮、日益更新，以及各個(gè)專業(yè)間的相互滲透與融合，這就要求實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員不僅要熟知本專業(yè)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法，同時(shí)還應(yīng)了解與熟悉其他與本專業(yè)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)技術(shù)的實(shí)質(zhì)是實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)積累與沉淀的過程，多次循環(huán)往復(fù)，不單單是實(shí)驗(yàn)技術(shù)熟練的過程，更是熟能生巧、巧中生新的過程。如Masson三色染色（Masson P，1929）經(jīng)歷了許多實(shí)驗(yàn)者不斷摸索、改良與優(yōu)化，以及各自對(duì)染色的理解與需求，使其在獲得準(zhǔn)確的染色結(jié)果前提下得到了技術(shù)上的提高，這就是一些傳統(tǒng)技術(shù)方法一直能沿用至今的緣故。新技術(shù)、新方法應(yīng)用的同時(shí)，傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)也不應(yīng)被忽略、放棄。為了能使更多的實(shí)驗(yàn)人員全面地了解形態(tài)學(xué)石蠟切片技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容，為了給以形態(tài)學(xué)改變?yōu)橐劳械难芯空n題提供實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)操作及注意事項(xiàng)等相應(yīng)的信息，同時(shí)也是為了對(duì)過去所積累的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行梳理總結(jié)，十位不同院校的編者共同努力完成了本書的編寫。
本書以實(shí)用性、穩(wěn)定性、可操作性為編寫宗旨。實(shí)用性是從使用者的角度，依據(jù)編者的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)總結(jié)和國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，去選擇與編排實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法與流程等，通過石蠟切片、蘇木精一伊紅染色、特殊染色以及免疫組織化學(xué)和原位雜交技術(shù)的介紹，使讀者對(duì)石蠟切片技術(shù)有一個(gè)全面的了解，也為相關(guān)形態(tài)學(xué)技術(shù)的學(xué)習(xí)奠定基礎(chǔ)。穩(wěn)定性是指所選用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果的穩(wěn)定性，對(duì)于初學(xué)者而言，實(shí)驗(yàn)操作及實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈現(xiàn)的可重復(fù)性尤為重要。而可操作性則是指從初學(xué)者的實(shí)際出發(fā)，對(duì)每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)力求介紹其原理、具體實(shí)驗(yàn)操作及實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)等，通俗易懂且操作性強(qiáng)，以期起到實(shí)驗(yàn)指南的作用。
有位前輩曾說過：一名合格的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備聽、說、讀、寫、思五項(xiàng)能力。聽，聽他人的實(shí)驗(yàn)思路、實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，以充實(shí)自身的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)；說，多與他人交流，在交流中捕捉靈感，豐滿與糾正實(shí)驗(yàn)過程；讀，博覽全書，閱讀文獻(xiàn)著作，積累素材，優(yōu)選實(shí)驗(yàn)方案；寫，手要勤，隨時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)感受與疑惑，尋找解決疑惑的途徑；思，則最為重要，實(shí)驗(yàn)中存在一些不確定性因素，勤于思考，設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)周密的實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線，隨時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)流程與操作。
在當(dāng)今生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，由于新技術(shù)、新方法的層出不窮、日益更新，以及各個(gè)專業(yè)間的相互滲透與融合，這就要求實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員不僅要熟知本專業(yè)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法，同時(shí)還應(yīng)了解與熟悉其他與本專業(yè)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)技術(shù)的實(shí)質(zhì)是實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)積累與沉淀的過程，多次循環(huán)往復(fù)，不單單是實(shí)驗(yàn)技術(shù)熟練的過程，更是熟能生巧、巧中生新的過程。
引言
第1章 形態(tài)學(xué)制片種類
一、非切片制作方法
二、組織切片制作方法
第2章 組織學(xué)石蠟切片制作技術(shù)
第1節(jié) 標(biāo)本取材
一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法
二、不同組織器官的取材方法
三、取材注意事項(xiàng)
附：大鼠胸、腹腔臟器的取材方法
第2節(jié) 標(biāo)本固定
一、固定的目的和作用
二、固定的方式
三、影響固定作用的因素
四、固定后的標(biāo)本修整
五、固定后的標(biāo)本沖洗
六、固定容器
七、常用固定劑的性質(zhì)及應(yīng)用
第3節(jié) 標(biāo)本處理過程：脫水、透明、浸蠟、包埋
一、脫水
二、透明
三、浸蠟
四、包埋
第4節(jié) 石蠟切片
一、石蠟切片機(jī)與切片刀
二、石蠟切片技術(shù)
第5節(jié) 染色與染料
一、染色與生物染料
二、染色作用的原理
三、染色方法
四、媒染劑和促染劑
五、染色形式
第6節(jié) 蘇木精伊紅染色
一、蘇木精
二、伊紅
三、石蠟切片蘇木精伊紅染色
第7節(jié) 封固
一、封固的目的
二、封固劑種類
三、封固劑的折光率
四、常規(guī)石蠟切片封固方法
第3章 特殊染色技術(shù)
第1節(jié) 膠原纖維染色
一、形態(tài)結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)
二、膠原纖維染色
三、磷鉬酸和（或）磷鎢酸在染色中的作用
四、影響結(jié)締組織三色染色的因素
附：苦味酸天狼猩紅染色顯示膠原纖維
第2節(jié) 彈性纖維染色
一、形態(tài)結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)
二、彈性纖維染色
第3節(jié) 網(wǎng)狀纖維染色
一、形態(tài)結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)
二、網(wǎng)狀纖維銨銀技術(shù)的基本步驟與作用
三、常用的銨銀方法
四、網(wǎng)狀纖維銨銀方法的基本要求
第4節(jié) 肥大細(xì)胞染色
一、形態(tài)結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)
二、肥大細(xì)胞染色
三、異染性
第5節(jié) 胰島細(xì)胞染色
一、胰島細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)
二、胰島細(xì)胞染色
第6節(jié) 糖原染色
一、顯示糖原的高碘酸雪夫(PAS)反應(yīng)
二、Best卡紅染色顯示肝糖原
第7節(jié) 細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA染色
一、Feulgen反應(yīng)顯示DNA
二、甲綠-派若寧染色顯示DNA和RNA
第8節(jié) 肌組織染色
一、Heidenhain鐵蘇木精染色
二、Mallory磷鎢酸蘇木精(PTAH)染色
第9節(jié) 神經(jīng)元（細(xì)胞）尼氏體染色
一、焦油紫染色
二、甲苯胺藍(lán)染色
三、硫堇染色
四、Luxol堅(jiān)牢藍(lán)-焦油紫染色
第4章 免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)技術(shù)
第1節(jié) 免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)相關(guān)的基本概念？
一、抗原
二、抗體
第2節(jié) 免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)基本類型與原理
一、免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)直接法
二、免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)間接法
三、非標(biāo)記抗體法
四、抗生物素生物素法
第3節(jié) 免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)技術(shù)的種類
第4節(jié) 免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)技術(shù)的基本過程
第5節(jié) 免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)石蠟切片的有關(guān)基本技術(shù)
一、用于免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)的標(biāo)本取材
二、用于免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)的標(biāo)本固定
三、用于免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)的標(biāo)本處理過程：脫水、透明、浸蠟、包埋
四、用于免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)石蠟切片的制作
五、常用的免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)方法
六、免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)染色主要步驟及注意事項(xiàng)
七、血清封閉排除非特異性著色
八、減少或消除內(nèi)源性生物素
九、抗體
十、顯色
十、檢測(cè)系統(tǒng)
十二、免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)復(fù)染
十三、孵育盒的作用？
十四、封固劑的使用
十五、免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)結(jié)果與非特異染色的控制
十六、常見的免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)問題
第6節(jié) 雙重免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)技術(shù)
一、雙重免疫標(biāo)記染色種類
二、常用的雙重免疫標(biāo)記配伍類型
三、雙重免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)的基本種類
四、常用的雙重免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)染色方法
五、消除雙重免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)染色間抗體系統(tǒng)的
交叉反應(yīng)
附：常用的酸性溶液洗脫方法與應(yīng)用
六、雙重免疫組織（細(xì)胞）化學(xué)注意事項(xiàng)
第5章 原位核酸分子雜交
第1節(jié) 原位核酸分子雜交的基礎(chǔ)知識(shí)
一、核酸的化學(xué)組成
二、DNA和RNA
三、DNA變性與復(fù)性
第2節(jié) 原位分子雜交的基本原理
一、基本原理
二、探針類型與制備
三、探針標(biāo)記物與探針標(biāo)記方法
第3節(jié) 原位核酸分子雜交技術(shù)的基本步驟與原理
一、雜交前準(zhǔn)備
二、雜交預(yù)處理
三、雜交反應(yīng)
四、雜交后處理
五、雜交體的檢測(cè)
第4節(jié) 對(duì)照實(shí)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)中的問題與對(duì)策
一、對(duì)照實(shí)驗(yàn)
二、實(shí)驗(yàn)中的問題與對(duì)策
第6章 形態(tài)學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)
第7章 附錄
第1章 形態(tài)學(xué)制片種類
組織學(xué)標(biāo)本的制作有很多方法，但總體上可以粗略歸納為兩大類：非切片制作方法和切片制作方法。
一、非切片制作方法
非切片制作方法，顧名思義就是無需借助于切片機(jī)（不需要切片操作）即可制成組織標(biāo)本的方法。非切片法制作組織標(biāo)本的種類很多，大致可包括：組織分離標(biāo)本、組織活體標(biāo)本、細(xì)胞涂片標(biāo)本、磨片標(biāo)本、整體封存標(biāo)本、組織鋪片標(biāo)本6類。依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮退^察的實(shí)驗(yàn)對(duì)象的要求可適當(dāng)?shù)剡x擇不同的標(biāo)本制作方法。
非切片制作方法的優(yōu)點(diǎn)：標(biāo)本制作方法簡(jiǎn)單，組織結(jié)構(gòu)基本不被破壞，能保持原有的組織或細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，最為重要的是標(biāo)本內(nèi)的細(xì)胞是完整的。制作過程所產(chǎn)生的人工假象較少；使用的藥物、儀器較少；在較短的時(shí)間內(nèi)即可觀察到組織或細(xì)胞的形態(tài)。但是，非切片制作方法應(yīng)用的范圍局限，有些組織標(biāo)本不能長(zhǎng)期保存、不能觀察到細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)是其不足之處。
�。ㄒ唬┙M織分離標(biāo)本
組織分離標(biāo)本主要是觀察機(jī)體的單個(gè)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)，如平滑肌細(xì)胞、脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞、呼吸道或消化道的上皮細(xì)胞等。目前，分離標(biāo)本制作的方法已不同于以前的應(yīng)用范圍，而是較為廣泛地應(yīng)用在許多專業(yè)，尤其是細(xì)胞培養(yǎng)方面的細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察。
傳統(tǒng)的組織分離標(biāo)本制作方法：將一小塊新鮮組織浸泡在一定濃度的某種化學(xué)試劑（氫氧化鈉）中，通過化學(xué)作用（腐蝕作用），溶解組織內(nèi)的結(jié)締組織和細(xì)胞間質(zhì)，再經(jīng)過振蕩、吹打和離心等程序，最后構(gòu)成組織的細(xì)胞成為一個(gè)個(gè)分離的單細(xì)胞狀態(tài)。
目前制作分離標(biāo)本的方法：新鮮組織經(jīng)過消化酶（胰蛋白酶等）的消化作用將被分離成單個(gè)細(xì)胞，再經(jīng)密度梯度離心等步驟，可獲得較為純化的單個(gè)細(xì)胞懸液。
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