目錄
前言
第一章 緒論 1
第一節(jié) 細(xì)胞工程的研究?jī)?nèi)容和任務(wù) 1
一、研究?jī)?nèi)容 1
二、研究任務(wù) 5
三、細(xì)胞工程相關(guān)分支學(xué)科 5
第二節(jié) 細(xì)胞工程發(fā)展歷史 7
一、探索期 7
二、成熟期 8
三、迅速發(fā)展期 10
第三節(jié) 細(xì)胞工程研究熱點(diǎn)領(lǐng)域 13
第四節(jié) 細(xì)胞工程學(xué)習(xí)方法 18
一、掌握細(xì)胞工程相關(guān)基本理論 18
二、掌握細(xì)胞工程相關(guān)研究方法和實(shí)驗(yàn)技術(shù) 18
三、掌握必要的文獻(xiàn)信息檢索途徑 18
四、細(xì)胞工程應(yīng)用研究進(jìn)展 18
思考題 19
第二章 細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室及實(shí)驗(yàn)基本操作 20
第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)室及儀器設(shè)備 20
一、實(shí)驗(yàn)室 20
二、儀器設(shè)備 22
第二節(jié) 細(xì)胞工程基本操作 24
一、清洗 24
二、消毒滅菌 25
三、無(wú)菌操作 28
第三節(jié) 培養(yǎng)基及其配制 29
一、植物細(xì)胞培養(yǎng)基及其配制 29
二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基及其配制 35
思考題 44
第三章 植物組織培養(yǎng) 45
第一節(jié) 外植體及其培養(yǎng) 45
一、外植體的選擇 45
二、外植體消毒處理 46
三、外植體的接種 47
四、外植體的培養(yǎng)條件 47
第二節(jié) 愈傷組織 49
一、愈傷組織的形成和增殖 50
二、影響愈傷組織培養(yǎng)的因素 52
第三節(jié) 愈傷組織的再分化與器官建成 54
一、植物細(xì)胞的全能性 54
二、細(xì)胞分化、脫分化與再分化 55
三、愈傷組織的分化與器官建成 56
第四節(jié) 植物試管苗的生根 58
一、試管內(nèi)生根 59
二、試管外生根 60
第五節(jié) 植物試管苗的移栽 61
一、試管苗的馴化 61
二、試管苗的移植 62
三、影響試管苗移植成活率的因素 63
第六節(jié) 植物細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng) 63
一、懸浮培養(yǎng) 64
二、單細(xì)胞培養(yǎng) 66
第七節(jié) 植物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng) 67
一、概述 67
二、植物細(xì)胞規(guī)�；�培養(yǎng)體系的建立 68
三、影響植物細(xì)胞規(guī)�；�培養(yǎng)的因素 70
第八節(jié) 植物細(xì)胞反應(yīng)器 72
一、植物細(xì)胞反應(yīng)器類型及其特點(diǎn) 72
二、用于植物細(xì)胞培養(yǎng)的反應(yīng)器 72
三、反應(yīng)器的設(shè)計(jì)與放大 75
四、植物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)力學(xué) 79
五、植物細(xì)胞反應(yīng)器控制技術(shù) 82
第九節(jié) 植物細(xì)胞培養(yǎng)與次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn) 84
一、植物細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物的主要類型 84
二、植物細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物積累的特性 86
三、提高植物細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物產(chǎn)量的方法 86
四、利用植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物實(shí)例 89
思考題 90
第四章 植物脫毒快速繁殖 91
第一節(jié) 植物組織脫毒 91
一、植物組織脫毒的概念與意義 91
二、植物組織脫毒方法及基本原理 92
三、植物組織脫毒基本技術(shù)規(guī)程 97
四、影響植物組織脫毒的因素 99
第二節(jié) 植物病毒檢測(cè)方法 99
一、植物形態(tài)學(xué)檢測(cè)法 99
二、指示植物檢測(cè)法 100
三、抗血清檢測(cè)法 100
四、組織細(xì)胞檢測(cè)法 100
五、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法 100
六、直接組織斑免疫測(cè)定法 102
七、膠體金免疫層析法 102
八、以核酸為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法 103
附：植物組織脫毒實(shí)例分析 105
一、馬鈴薯莖尖培養(yǎng)脫毒方法 105
二、三葉半夏脫毒組培 105
思考題 107
第五章 植物體細(xì)胞雜交 108
第一節(jié) 植物細(xì)胞原生質(zhì)體制備 108
一、植物細(xì)胞原生質(zhì)體分離 109
二、植物細(xì)胞原生質(zhì)體純化 112
三、植物細(xì)胞原生質(zhì)體活力測(cè)定 113
四、影響植物細(xì)胞原生質(zhì)體制備的因素 114
第二節(jié) 植物原生質(zhì)體培養(yǎng)與保存 118
一、植物原生質(zhì)體培養(yǎng)基選擇 118
二、原生質(zhì)體的培養(yǎng)方式 119
三、植物原生質(zhì)體保存方法 121
四、影響植物原生質(zhì)體培養(yǎng)的因素 122
第三節(jié) 植物體細(xì)胞雜交控制技術(shù) 123
一、植物體細(xì)胞雜交概述 123
二、植物體細(xì)胞雜交一般規(guī)程 125
三、影響植物體細(xì)胞雜交的因素 131
附：植物愈傷組織原生質(zhì)體與體細(xì)胞雜交操作實(shí)例 132
芝麻原生質(zhì)體培養(yǎng) 132
思考題 134
第六章 植物轉(zhuǎn)基因技術(shù) 135
第一節(jié) 植物基因轉(zhuǎn)化受體體系 135
一、葉盤(pán)受體體系 135
二、原生質(zhì)體受體體系 136
三、懸浮細(xì)胞受體體系 136
四、愈傷組織受體體系 136
五、胚狀體受體體系 137
六、活體受體體系 137
第二節(jié) 植物基因轉(zhuǎn)化方法 137
一、農(nóng)桿菌介導(dǎo)法 137
二、基因槍轉(zhuǎn)化法 138
三、PEG介導(dǎo)法 140
四、花粉管通道法 140
五、其他轉(zhuǎn)化方法 140
第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因檢測(cè)技術(shù) 142
一、形態(tài)特征檢測(cè) 142
二、報(bào)告基因檢測(cè) 143
三、分子生物學(xué)方法檢測(cè) 144
第四節(jié) 轉(zhuǎn)基因植物的研究成果及安全性 146
一、轉(zhuǎn)基因植物的研究成果 146
二、轉(zhuǎn)基因植物的安全性 147
思考題 148
第七章 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 149
第一節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng) 149
一、動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)類型 149
二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)特性 150
三、動(dòng)物細(xì)胞取材與分離 151
四、動(dòng)物細(xì)胞同步化獲得方法 154
五、動(dòng)物細(xì)胞保存 156
第二節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng) 157
一、動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng) 158
二、動(dòng)物細(xì)胞貼壁培養(yǎng) 158
第三節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞固定化培養(yǎng) 159
一、固定化培養(yǎng)材料 159
二、固定化培養(yǎng)條件 161
第四節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng) 162
一、微載體培養(yǎng) 163
二、中空纖維培養(yǎng) 164
三、微囊化培養(yǎng) 166
第五節(jié) 干細(xì)胞培養(yǎng)工程 166
一、干細(xì)胞定義 166
二、干細(xì)胞研究意義 168
三、動(dòng)物干細(xì)胞工程技術(shù) 169
四、干細(xì)胞技術(shù)的應(yīng)用前景和研究中存在的問(wèn)題 176
第六節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞反應(yīng)器 179
一、動(dòng)物細(xì)胞反應(yīng)器基本原理 179
二、動(dòng)物細(xì)胞反應(yīng)器類型與特點(diǎn) 180
三、動(dòng)物細(xì)胞反應(yīng)器設(shè)計(jì) 184
四、動(dòng)物細(xì)胞反應(yīng)器應(yīng)用前景 185
思考題 185
第八章 動(dòng)物細(xì)胞染色體工程 186
第一節(jié) 動(dòng)物多倍體誘導(dǎo) 186
一、天然多倍體 186
二、人工誘導(dǎo)多倍體 186
第二節(jié) 雌雄核發(fā)育和性別控制 190
一、雌核發(fā)育 190
二、雄核發(fā)育 192
三、性別控制 192
第三節(jié) 染色體片段轉(zhuǎn)移和特定位點(diǎn)重組技術(shù) 193
一、染色體片段轉(zhuǎn)移技術(shù) 193
二、染色體特定位點(diǎn)重組技術(shù) 194
思考題 194
第九章 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 195
第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備 195
一、目的基因?qū)��?195
二、轉(zhuǎn)基因胚胎培養(yǎng)與移植 200
三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物鑒定 200
第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物應(yīng)用前景 200
一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在基礎(chǔ)生物學(xué)研究中的應(yīng)用 200
二、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用 201
三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在畜牧業(yè)和漁業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用 205
第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究存在的問(wèn)題 205
一、技術(shù)性問(wèn)題 205
二、社會(huì)性問(wèn)題 206
思考題 207
第十章 胚胎工程 208
第一節(jié) 概述 208
一、發(fā)展歷史 208
二、研究意義 209
第二節(jié) 胚胎工程的技術(shù)方法 210
一、胚胎移植相關(guān)技術(shù)體系 211
二、胚胎分割技術(shù)體系 219
三、胚胎干細(xì)胞技術(shù) 224
第三節(jié) 試管動(dòng)物 226
一、概述 226
二、試管嬰兒 226
三、試管嬰兒主要技術(shù)環(huán)節(jié) 228
四、胚胎工程技術(shù)的現(xiàn)狀分析 229
思考題 232
第十一章 微生物細(xì)胞工程原理 233
第一節(jié) 微生物細(xì)胞工程概述 233
一、微生物細(xì)胞工程定義 234
二、微生物細(xì)胞工程意義 234
三、微生物細(xì)胞工程應(yīng)用 234
第二節(jié) 微生物細(xì)胞工程菌種 235
一、微生物細(xì)胞工程菌種來(lái)源 236
二、微生物細(xì)胞工程菌種分離 236
三、微生物細(xì)胞工程菌種選育 237
四、微生物細(xì)胞工程菌種保存 244
第三節(jié) 微生物細(xì)胞工程代謝調(diào)控 246
一、代謝類型 246
二、代謝調(diào)控 247
第四節(jié) 微生物細(xì)胞發(fā)酵工藝控制技術(shù) 248
一、微生物細(xì)胞發(fā)酵參數(shù)檢測(cè) 248
二、微生物細(xì)胞的發(fā)酵類型 250
三、微生物發(fā)酵動(dòng)力學(xué) 251
第五節(jié) 微生物細(xì)胞發(fā)酵下游加工技術(shù) 257
一、微生物細(xì)胞發(fā)酵下游加工的特點(diǎn)和重要性 258
二、微生物細(xì)胞發(fā)酵下游加工基本原理 259
三、微生物細(xì)胞發(fā)酵下游加工的一般程序和操作單元 259
第六節(jié) 微生物細(xì)胞工程的應(yīng)用 264
一、微生物細(xì)胞工程在食品工業(yè)中的應(yīng)用 264
二、微生物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用 264
三、微生物工程在輕工業(yè)中的應(yīng)用 265
四、微生物細(xì)胞工程在化工能源產(chǎn)品中的應(yīng)用 265
五、微生物細(xì)胞工程在環(huán)境保護(hù)中的應(yīng)用 266
六、微生物細(xì)胞工程在醫(yī)藥衛(wèi)生中的應(yīng)用 266
附：微生物細(xì)胞工程應(yīng)用實(shí)例分析 268
一、抗生素發(fā)酵生產(chǎn) 268
二、氨基酸發(fā)酵生產(chǎn) 269
思考題 271
主要參考文獻(xiàn) 272