目錄
第二版序
第二版前言
**版前言
第1章 化學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本知識(shí) 1
1.1實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及須知 1
1.2實(shí)驗(yàn)室安全及防護(hù)知識(shí) 1
1.2.1生物源的危害和防護(hù) 1
1.2.2放射性和紫外線(xiàn)輻射的危害和防護(hù) 2
1.2.3生物樣品的存放 2
1.2.4生物類(lèi)實(shí)驗(yàn)廢棄物的處理 2
1.2.5其他的實(shí)驗(yàn)室安全及防護(hù)知識(shí)、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理 3
第2章 化學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作 5
2.1常用儀器的洗滌 5
2.1.1玻璃器皿的洗滌 5
2.1.2其他材質(zhì)器皿的洗滌 5
2.2常用消毒滅菌方法 6
2.2.1物理消毒滅菌方法 6
2.2.2化學(xué)消毒滅菌方法 6
2.3化學(xué)生物學(xué)樣品的處理和純化 7
2.3.1材料的選取和前處理 7
2.3.2細(xì)胞的破碎 7
2.3.3蛋白質(zhì)的提取和純化 8
2.3.4核酸的提取和純化 8
2.3.5樣品的濃縮和干燥 9
2.4離心技術(shù) 9
2.4.1離心技術(shù)的原理 9
2.4.2離心機(jī)的類(lèi)型和轉(zhuǎn)頭的分類(lèi) 10
2.4.3常用離心方法 11
2.4.4高速冷凍離心機(jī) 12
2.5常用色譜分離技術(shù) 13
2.5.1凝膠色譜 13
2.5.2離子交換色譜 14
2.5.3反相色譜 14
2.6電泳技術(shù) 14
2.6.1基本原理 14
2.6.2瓊脂糖凝膠電泳 15
2.6.3聚丙烯酰胺凝膠電泳 15
2.6.4毛細(xì)管電泳 16
2.6.5凝膠成像技術(shù) 16
2.7 PCR技術(shù) 16
2.7.1 PCR技術(shù)簡(jiǎn)介 16
2.7.2 PCR技術(shù)的基本原理和過(guò)程 17
2.7.3 PCR的五個(gè)元素 17
2.7.4 PCR儀及其使用 18
2.8細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 19
2.8.1體外培養(yǎng)細(xì)胞的分類(lèi) 19
2.8.2培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖過(guò)程 20
2.8.3原代細(xì)胞的培養(yǎng) 21
2.9其他儀器的使用 21
2.9.1移液槍 21
2.9.2氣相色譜儀 22
2.9.3液相色譜儀 24
2.9.4紅外光譜儀 24
2.9.5熒光分光光度計(jì) 25
2.9.6二氧化碳培養(yǎng)箱 26
2.9.7倒置相差顯微鏡 27
2.9.8酶標(biāo)儀 29
2.9.9活體熒光成像系統(tǒng) 29
2.9.10激光粒度儀 30
2.9.11流式細(xì)胞儀 31
第 3章 生化分離分析實(shí)驗(yàn) 32
實(shí)驗(yàn) 1疏水作用色譜分離純化 .-淀粉酶 32
實(shí)驗(yàn) 2親和色譜樹(shù)脂的制備及溶菌酶的提取純化 37
實(shí)驗(yàn) 3青霉素�；�酶米氏常數(shù)和反應(yīng)活性的測(cè)定 42
實(shí)驗(yàn) 4靜電自組裝構(gòu)筑 HRP多層膜電極檢測(cè)酚類(lèi)物質(zhì)研究 46
實(shí)驗(yàn) 5 FRET法及熒光猝滅法測(cè)定蛋白酶的活性 49
第 4章 生物材料制備實(shí)驗(yàn) 55
實(shí)驗(yàn) 6生物礦物和生物礦化——碳酸鈣多形的控制與制備 55
實(shí)驗(yàn) 7無(wú)定形碳酸鈣的制備和轉(zhuǎn)化 58
實(shí)驗(yàn) 8聚乙烯亞胺-DNA復(fù)合物粒徑和表面電荷的測(cè)定 61
實(shí)驗(yàn) 9復(fù)凝聚法制備阿霉素微囊及其質(zhì)量評(píng)價(jià) 63
實(shí)驗(yàn) 10鹽酸左氧氟沙星不同晶型的制備及其表征 66
第 5章 化學(xué)中基因工程實(shí)驗(yàn) 70
實(shí)驗(yàn) 11大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備與質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)化 70
實(shí)驗(yàn) 12瓊脂糖凝膠電泳分離 DNA片段 73
實(shí)驗(yàn) 13 PCR基因擴(kuò)增獲取毛囊 DNA及其分離 75
實(shí)驗(yàn) 14植物基因組 DNA的提取與擴(kuò)增 77
實(shí)驗(yàn) 15 PCR-RFLP法檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性 81
實(shí)驗(yàn) 16基于連接反應(yīng)的滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性 86
實(shí)驗(yàn) 17枯草桿菌脂肪酶 A的基因克隆 89
第 6章 化學(xué)中蛋白質(zhì)工程實(shí)驗(yàn) 96
實(shí)驗(yàn) 18 2′-脫氧尿苷衍生物的酶促合成的選擇性調(diào)控 96
實(shí)驗(yàn) 19酶催化邁克爾加成反應(yīng) 98
實(shí)驗(yàn) 20 Novozym 435催化的 1-位芳基取代的末端炔丙醇動(dòng)力學(xué)拆分反應(yīng) 100
實(shí)驗(yàn) 21金屬卟啉模擬的生物氧化過(guò)程 102
實(shí)驗(yàn) 22操控式分子動(dòng)力學(xué)模擬：以泛素蛋白的 3D結(jié)構(gòu)研究為例 106
實(shí)驗(yàn) 23新冠病毒受體結(jié)合域 (RBD)與受體蛋白 ACE2相互作用的分子模擬 121
實(shí)驗(yàn) 24 Docking：以新冠病毒刺突蛋白受體結(jié)合域 (RBD)與橙皮苷分子對(duì)接為例 130
第7章 化學(xué)中細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn) 140
實(shí)驗(yàn) 25 MTT法測(cè)定聚乙烯亞胺的細(xì)胞毒性 140
實(shí)驗(yàn) 26抗腫瘤藥物 5-氟尿嘧啶對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制及細(xì)胞形態(tài)觀察 142
實(shí)驗(yàn) 27基于熒光分子探針的細(xì)胞內(nèi)活性氧水平測(cè)定 144
實(shí)驗(yàn) 28抗腫瘤藥物 5-氟尿嘧啶對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移的影響 146
實(shí)驗(yàn) 29聚乙烯亞胺 -DNA復(fù)合物體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn) 148
實(shí)驗(yàn) 30聚乙烯亞胺攜帶基因在細(xì)胞中的熒光染色實(shí)驗(yàn) 150
實(shí)驗(yàn) 31聚乙烯亞胺作為基因載體材料攜帶 TRAIL基因?qū)��?xì)胞凋亡的影響 153
實(shí)驗(yàn) 32聚乙烯亞胺 -阿霉素復(fù)合物的細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn) 156
實(shí)驗(yàn) 33聚乙烯亞胺 -阿霉素實(shí)體瘤原位注射成像實(shí)驗(yàn) 158
實(shí)驗(yàn) 34流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) 159
第 8章 探索性實(shí)驗(yàn) 162
實(shí)驗(yàn) 35環(huán)糊精-聚乙烯亞胺聚合物的合成及攜帶基因藥物的性質(zhì)實(shí)驗(yàn) 162
實(shí)驗(yàn) 36 脂肪酶 CALB的理性設(shè)計(jì)及其對(duì)仲醇立體選擇性的調(diào)控 165
實(shí)驗(yàn) 37大豆食品中轉(zhuǎn)基因成分的分析 171
參考文獻(xiàn) 175
附錄 178附錄 1常用化學(xué)生物學(xué)緩沖溶液的配制 178
附錄 2常用特殊化學(xué)生物學(xué)試劑的配制 179
附錄 3生物信息數(shù)據(jù)庫(kù) 180