本書通過(guò)總述、分述,再總述介紹了嗜尸性蠅類分子鑒定的應(yīng)用發(fā)展?fàn)顩r、蠅類DNA提取的評(píng)價(jià)、分子標(biāo)記的選擇以及未來(lái)分子鑒定的趨勢(shì)等內(nèi)容,是一本基礎(chǔ)理論與實(shí)踐并重的實(shí)用工具書。
盡管傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)分類仍舊被廣泛應(yīng)用,但分子生物學(xué)的快速發(fā)展給嗜尸性蠅類的種屬鑒定提供了新的契機(jī),它能夠在基因水平上對(duì)物種進(jìn)行快速有效的鑒別,同時(shí)還可以探討昆蟲的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)特點(diǎn)。
本書共七章,基于以線粒體和核基因?yàn)橹鞯臈l形碼技術(shù)為嗜尸性蠅類分子鑒定的研究熱點(diǎn),將分子與形態(tài)學(xué)鑒定相結(jié)合,為嗜尸性蠅類種屬鑒定提供更準(zhǔn)確、可靠的參考依據(jù)。隨著測(cè)序成本的降低,目前GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中常見(jiàn)嗜尸性蠅類的參考序列已基本覆蓋,因此分子鑒定將被廣泛應(yīng)用于實(shí)際案件中。
2020年,在司法部《法醫(yī)類司法鑒定執(zhí)業(yè)分類規(guī)定》(司規(guī)〔2020〕3號(hào))中,已經(jīng)明確將法醫(yī)昆蟲學(xué)列至第二章法醫(yī)病理鑒定條款中。該文件的頒布,使昆蟲學(xué)證據(jù)終于能夠合法有效地用于法庭審判階段,法醫(yī)昆蟲學(xué)研究和應(yīng)用也必將迎來(lái)新一輪高潮。
隨著法醫(yī)昆蟲學(xué)的不斷發(fā)展,應(yīng)用嗜尸性昆蟲的生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律和尸體上昆蟲演替規(guī)律推斷死亡時(shí)間成為可能,但這要求快速、準(zhǔn)確地鑒別嗜尸性昆蟲的種屬。分子生物學(xué)的快速發(fā)展為嗜尸性蠅類種屬鑒定提供了新的途徑,經(jīng)過(guò)大量的嘗試與探索,特別是近十幾年來(lái),國(guó)內(nèi)研究者在全國(guó)不同地域采集蠅類標(biāo)本進(jìn)行序列分析研究,在提取方法、基因片段種屬鑒定效果、種屬鑒定應(yīng)用等方面取得了較大的研究成果。
本書根據(jù)國(guó)內(nèi)相關(guān)記錄和研究,結(jié)合本人科研實(shí)踐,對(duì)進(jìn)行過(guò)分子鑒定的蠅種、地區(qū)及采用的分子標(biāo)記進(jìn)行闡述,同時(shí)以蠅類分子鑒定中的關(guān)鍵點(diǎn)單獨(dú)建立章節(jié),以期為我國(guó)嗜尸性蠅類的種屬鑒定提供基礎(chǔ)方法,促進(jìn)法醫(yī)昆蟲學(xué)的發(fā)展和應(yīng)用。
翟仙敦
2021年11月
翟仙敦,河南科技大學(xué),副院長(zhǎng)、副教授,從事法醫(yī)昆蟲學(xué)分子鑒定研究多年,主持該領(lǐng)域河南省科技廳項(xiàng)目1項(xiàng),河南省教育廳項(xiàng)目一項(xiàng)。昆蟲研究方向,已經(jīng)畢業(yè)研究生5名。發(fā)表該領(lǐng)域論文10篇,授權(quán)發(fā)明專利1項(xiàng),實(shí)用新型專利1項(xiàng)。
1.河南省基礎(chǔ)與前沿課題(112300410082)嗜尸性蠅類種屬鑒定新遺傳標(biāo)記及其突變規(guī)律研究,已結(jié)題,主持。
2.河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研項(xiàng)目(18B310002)河南地區(qū)嗜尸性蠅類全線粒體基因組檢測(cè)分析及地區(qū)數(shù)據(jù)庫(kù)的建立,已結(jié)題,主持。
章我國(guó)嗜尸性蠅類分子鑒定的研究現(xiàn)狀與分析1
一、研究背景1
二、嗜尸性蠅類用于推斷PMI的瓶頸3
三、分子生物學(xué)鑒定4
四、研究現(xiàn)狀及分析8
五、展望12
參考文獻(xiàn)13
第二章嗜尸性蠅類DNA提取16
節(jié)材料與方法17
一、主要試劑及儀器17
二、實(shí)驗(yàn)方法17
第二節(jié)提取方法的結(jié)果21
一、DNA濃度和純度檢測(cè)結(jié)果21
二、電泳檢測(cè)結(jié)果22
三、PCR產(chǎn)物電泳檢測(cè)結(jié)果22
第三節(jié)提取方法的分析與評(píng)價(jià)23
參考文獻(xiàn)25
第三章常用嗜尸性蠅類分子標(biāo)記27
節(jié)線粒體DNA分子標(biāo)記28
一、線粒體細(xì)胞色素氧化輔酶Ⅰ29
二、線粒體細(xì)胞色素氧化輔酶Ⅱ34
三、16S rDNA35
第二節(jié)核DNA分子標(biāo)記37
一、ITS238
二、28S rRNA40
第三節(jié)其他遺傳標(biāo)記41
參考文獻(xiàn)42
第四章洛陽(yáng)地區(qū)嗜尸性蠅類的分子鑒定44
節(jié)兩種基因片段用于分析嗜尸性麗蠅45
一、材料與方法45
二、結(jié)果47
三、小結(jié)57
第二節(jié)兩種基因片段分析常見(jiàn)嗜尸性麻蠅58
一、材料與方法59
二、結(jié)果59
三、小結(jié)66
參考文獻(xiàn)68
第五章常見(jiàn)近緣種的分子生物學(xué)研究70
節(jié)嗜尸性麗蠅的ITS2基因序列分析71
一、材料與方法71
二、結(jié)果73
三、小結(jié)78
第二節(jié)近緣種銅綠蠅和絲光綠蠅ITS2基因序列分析80
一、材料與方法80
二、結(jié)果80
三、小結(jié)82
第三節(jié)多分子標(biāo)記對(duì)叉葉綠蠅和亮綠蠅的序列分析87
一、材料與方法88
二、結(jié)果92
三、小結(jié)101
參考文獻(xiàn)103
第六章嗜尸性蠅類序列分析的法醫(yī)學(xué)意義105
節(jié)嗜尸性蠅類與死亡時(shí)間推斷105
第二節(jié)嗜尸性蠅類與死亡地點(diǎn)推斷110
參考文獻(xiàn)114
第七章基于CNKI的嗜尸性蠅類文獻(xiàn)分析117
一、研究過(guò)程與分析117
二、研究結(jié)論與啟示124
參考文獻(xiàn)125