目 錄
前言
第一章 基本型細(xì)胞實驗
第一節(jié) 細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)觀察及組成顯示 001
實驗1血細(xì)胞裝片和涂片的制備及染色觀察 002
實驗2植物細(xì)胞的葉綠體、線粒體及液泡觀察 005
實驗3青蛙或蟾蜍胸骨劍突軟骨細(xì)胞高爾基體的中性紅染色 006
實驗4馬鈴薯和花生徒手切片的制備及細(xì)胞內(nèi)多糖、脂肪的染色 007
實驗5 孚爾根法顯示細(xì)胞中的DNA 009
實驗6甲基綠一派洛寧染色法顯示細(xì)胞中的DNA和RNA 010
實驗7考馬斯亮藍(lán)染色法顯示洋蔥鱗莖內(nèi)表皮及小鼠巨噬細(xì)胞的細(xì)胞骨架 011
實驗8酸性磷酸酶法顯示巨噬細(xì)胞溶酶體 015
實驗9細(xì)胞中過氧化物酶體的顯示 016
實驗10酶免疫細(xì)胞化學(xué)法顯示人工細(xì)胞表面CD3分子 018
實驗11細(xì)胞大小的顯微測量 019
第二節(jié) 細(xì)胞計數(shù) 021
實驗12常規(guī)血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù) 021
第三節(jié) 細(xì)胞生理 023
實驗13哺乳動物紅細(xì)胞膜的通透性檢測 023
實驗14植物細(xì)胞質(zhì)壁分離現(xiàn)象觀察及質(zhì)壁分離法測定基態(tài)滲透值 024
賣驗15小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象觀察及吞噬活性檢測 026
實驗16臺盼藍(lán)染料排除法檢測活細(xì)胞比率 028
第四節(jié) 細(xì)胞分裂 030
實驗17壓片法制備植物細(xì)胞分裂標(biāo)本片及分裂各期細(xì)胞特征觀察 030
實驗18滴片法制備動物細(xì)胞分裂標(biāo)本片及細(xì)胞分裂指數(shù)分析 032
第五節(jié) 細(xì)胞裂解及效果檢測 034
實驗19小鼠腹水瘤細(xì)胞裂解及乳酸脫氫酶活性檢測 035
第六節(jié) 細(xì)胞器的分離 036
實驗20植物細(xì)胞葉綠體的分離 037
實驗21 動物細(xì)胞線粒體的分離 038
第七節(jié) 細(xì)胞融合 040
實驗22 PEG介導(dǎo)的細(xì)胞融合實驗 041
第二章 綜合型細(xì)胞實驗 043
第一節(jié) 細(xì)胞的分離與分選 043
實驗23密度梯度離心法分離血液單個核細(xì)胞 044
實驗24免疫磁珠分選法分離小鼠脾臟CD4~ T淋巴細(xì)胞 046
實驗25 T細(xì)胞的免疫熒光標(biāo)記及流式細(xì)胞儀分選實驗 048
第二節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實驗 050
實驗26貼壁細(xì)胞的原代培養(yǎng)實驗 051
實驗27貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)實驗 054
實驗28細(xì)胞凍存與解凍復(fù)蘇實驗 056
實驗29動物外周血細(xì)胞培養(yǎng)及染包體制備實驗 059
第三節(jié) 細(xì)胞增殖及細(xì)胞活力檢測實驗 061
實驗30 MTT比色法檢測細(xì)胞增殖與活力 062
實驗31 CCK 8法檢測細(xì)胞增殖與活力 063
第四節(jié) 細(xì)胞黏附與遷移分析 065
實驗32腫瘤細(xì)胞黏附能力分析實驗 066
實驗33 檢測腫瘤細(xì)胞侵襲能力的Transwell小室實驗 067
實驗34腫瘤細(xì)胞遷移的劃痕實驗 069
第五節(jié) 細(xì)胞的激活及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子檢測 070
實驗35利用鈣離子熒光探針檢測細(xì)胞內(nèi)Ca2 J 濃度， 071
實驗36信號蛋白磷酸化水平檢測實驗 073
實驗37轉(zhuǎn)錄因子NF KB活性檢測實驗 075
第六節(jié) 哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因及表達檢測 077
實驗38綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的小鼠成纖維細(xì)胞及表達檢測 078
第七節(jié) 細(xì)胞周期調(diào)控及檢測 080
實驗39利用流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期時相 081
實驗40細(xì)胞周期蛋白D1基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞及細(xì)胞周期檢測 084
實驗41 胸腺嘧啶脫氧核苷( TdR)雙阻斷法同步化培養(yǎng)的動物細(xì)胞 086
實驗42秋水仙胺阻抑法分離貼壁培養(yǎng)的哺乳動物M期細(xì)胞 088
實驗43植物細(xì)胞中期同步化誘導(dǎo) 089
第三章 開放探索型細(xì)胞實驗 091
第一節(jié) 細(xì)胞凋亡及細(xì)胞脹亡的誘導(dǎo)及檢測 091
實驗44凋亡細(xì)胞及脹亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測 092
實驗45 Annexin V FITC/PI雙染色法檢測凋亡與脹亡細(xì)胞 094
實驗46凋亡細(xì)胞DNA的電泳檢測 096
實驗47 TUNEL技術(shù)原位檢測凋亡細(xì)胞 098
第二節(jié) 細(xì)胞白噬的誘導(dǎo)及檢測 101
實驗48 MDC染色法檢測巨噬細(xì)胞白噬現(xiàn)象” 102
實驗49 GFP LC3墓因轉(zhuǎn)染法顯示白噬體 104
第三節(jié) 細(xì)胞衰老的誘導(dǎo)與檢測 105
實驗50細(xì)胞ROS的流式細(xì)胞儀檢測 106
實驗51 H70.誘導(dǎo)細(xì)胞衰老及胞內(nèi)衰老相關(guān)的p一半乳糖苷酶檢測 108
第四節(jié) 細(xì)胞分化的誘導(dǎo)及檢測 110
實驗52骨髓造血干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化實驗 112
實驗53視黃酸誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化及檢測實驗 115
第五節(jié) 小干擾RNA引起的基因沉默實驗 117
實驗54 RNA干擾沉默綠色熒光蛋白基因 118
第六節(jié) 細(xì)胞端粒酶活性檢測實驗 120
實驗55腫瘤細(xì)胞的端粒酶活性檢測 121
第四章 細(xì)胞生物學(xué)著名的實驗發(fā)現(xiàn) 124
一、細(xì)胞膜磷脂雙層的發(fā)現(xiàn) 125
二、線粒體的發(fā)現(xiàn)與功能研究 126
三、溶酶體的發(fā)現(xiàn) 126
四、高爾基體的發(fā)現(xiàn) 127
五、細(xì)胞周期調(diào)控的發(fā)現(xiàn) 127
六、照亮細(xì)胞的綠色熒光蛋白 128
七、細(xì)胞凋亡與線蟲 129
八、蛋白質(zhì)的地址簽 129
第五章 細(xì)胞生物學(xué)先進儀器設(shè)備 131
第一節(jié) 細(xì)胞觀察儀器 131
一、相差顯微鏡 131
二、透射電子顯微鏡 132
三、激光掃描共聚焦顯微鏡 134
四、超高分辨率熒光顯微鏡 139
五、高內(nèi)涵細(xì)胞成像和分析系統(tǒng) 142
第二節(jié) 細(xì)胞分選設(shè)備 145
一、流式細(xì)胞儀 145
二、細(xì)胞磁分選儀 148
第三節(jié) 細(xì)胞破碎設(shè)備 150
第四節(jié) 細(xì)胞切片制作設(shè)備 151
第五節(jié) 細(xì)胞酶活等分析設(shè)備 152
附錄一本書常用溶液配制方法 155
附錄二腹水瘤小鼠模型建立方法 157
附錄三細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備工作 158