本書以微生物的一般實驗方法為基礎(chǔ),結(jié)合環(huán)境微生物學(xué)的實驗教學(xué)要求,從微生物分離篩選、培養(yǎng)、一般鑒定方法、環(huán)境因子對微生物影響以及環(huán)境監(jiān)測等,由25個獨立實驗構(gòu)成,內(nèi)容包括實驗器具滅菌消毒,培養(yǎng)基配制,顯微鏡使用,細菌染色與形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察,細胞大小和數(shù)量測定等基礎(chǔ)方法。根據(jù)近年環(huán)境微生物學(xué)及其實驗手段飛速發(fā)展的特點,特別編著了環(huán)境中活的但非可培養(yǎng)(VBNC)狀態(tài)細菌優(yōu)勢菌種的分離,厭氧細菌的一般分離與培養(yǎng),微生物菌種的一般保藏與恢復(fù)培養(yǎng),土壤以及活性污泥中微生物總DNA的抽提,16SrRNA基因PCR擴增與系統(tǒng)樹,DGGE解析法;結(jié)合環(huán)境微生物的檢測實驗,安排了環(huán)境因子對微生物生長的影響,微生物對有機物的降解與轉(zhuǎn)化,水中細菌總數(shù)與大腸菌群的檢測,活性污泥的生物相觀察以及樣品致突變毒性檢測的Ames實驗,力求體現(xiàn)環(huán)境微生物學(xué)前沿性和創(chuàng)新性的特點。對編撰的實驗項目可以根據(jù)實際教學(xué)要求增減或合并。
更多科學(xué)出版社服務(wù),請掃碼獲取。
環(huán)境微生物學(xué)以微生物學(xué)為基礎(chǔ),利用微生物在環(huán)境污染治理、環(huán)境生態(tài)修復(fù)中的特殊地位與作用,已經(jīng)成為當代環(huán)境科學(xué)發(fā)展、涉及多學(xué)科和跨學(xué)科的現(xiàn)代生命科學(xué)的前沿學(xué)科之一。在過去的幾十年中,由于環(huán)境生態(tài)污染加劇,人們對環(huán)境中微生物群體結(jié)構(gòu)以及多樣性特征的認識不斷深化,因此對實驗方法和技術(shù)手段也需不斷更新與完善。
根據(jù)一般環(huán)境微生物學(xué)實驗的教學(xué)要求,本書編寫了環(huán)境微生物的分離篩選、培養(yǎng)保存、形態(tài)觀察和一般鑒定方法,環(huán)境因子對微生物生長的影響以及在環(huán)境監(jiān)測中的微生物學(xué)實驗手段等基礎(chǔ)實驗。近年,人們對環(huán)境微生物認知逐漸加深,迫切需要創(chuàng)新科學(xué)實驗手段的支持,為此,在微生物學(xué)實驗的基礎(chǔ)上增加了分子生物學(xué)等實驗,編寫有土壤以及活性污泥中微生物總DNA的抽提,16SrRNA基因的PCR擴增與系統(tǒng)樹構(gòu)建,DGGE法對微生物群集組成的解析;诃h(huán)境微生物總量的90%以上處于未培養(yǎng)與活的但非可培養(yǎng)(VBNC)狀態(tài)的認識,設(shè)計了利用Rpf信號蛋白分子對VBNC細菌優(yōu)勢菌種的復(fù)蘇與促進生長、提高分離豐度的探索性實驗方法,力求體現(xiàn)環(huán)境微生物學(xué)實驗前沿性和創(chuàng)新性的特點。
本書由浙江師范大學(xué)地理與環(huán)境科學(xué)學(xué)院多年從事教學(xué)、科研及實驗指導(dǎo)的教師陳建榮、丁林賢和盛貽林編寫。由盛貽林、丁林賢負責內(nèi)容整理與編排等工作,陳建榮教授對全書進行了統(tǒng)稿、審核和定稿。
由于編者水平有限和時間倉促,書中不妥之處在所難免,熱忱希望讀者諒解并批評指正。
編者
2016年3月
目錄
前言
第一部分 環(huán)境微生物實驗基本操作及注意事項1
第二部分 環(huán)境微生物實驗4
實驗一普通光學(xué)顯微鏡的使用4
實驗二培養(yǎng)基的制備及滅菌11
實驗三細菌的革蘭氏染色與形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察19
實驗四細菌的芽孢、鞭毛、莢膜染色法22
實驗五真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察25
實驗六放線菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察29
實驗七微生物細胞大小和數(shù)量測定33
實驗八無菌操作及接種技術(shù)37
實驗九土壤中微生物的分離與純化培養(yǎng)43
實驗十環(huán)境樣品中優(yōu)勢菌種的分離與計數(shù)48
實驗十一環(huán)境樣品中未培養(yǎng)VBNC資源細菌的分離51
實驗十二厭氧細菌的一般分離與培養(yǎng)54
實驗十三酵母菌的加富培養(yǎng)與分離56
實驗十四微生物菌種的一般保藏與恢復(fù)培養(yǎng)59
實驗十五土壤中微生物總DNA的提取67
實驗十六活性污泥中微生物總DNA的提取69
實驗十七細菌DNA瓊脂糖凝膠電泳實驗72
實驗十八細菌16SrRNA基因的PCR擴增技術(shù)74
實驗十九DGGE法解析環(huán)境樣本中微生物的多樣性78
實驗二十環(huán)境因子對微生物生長的影響82
實驗二十一微生物對有機物的降解與轉(zhuǎn)化86
實驗二十二微生物對含氮化合物的轉(zhuǎn)化89
實驗二十三水中細菌總數(shù)與大腸菌群的檢測92
實驗二十四活性污泥及其生物相的觀察96
實驗二十五樣品致突變毒性檢測Ames實驗102
第三部分 附錄106
附錄一常用培養(yǎng)基及其配制法106
附錄二常用染色液的配法111
附錄三常用染色方法114
附錄四MPN表118
參考文獻120