細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程第一章顯微成像技術(shù)第一章顯微成像技術(shù)
生物學(xué)，尤其是細(xì)胞生物學(xué)的許多重大發(fā)現(xiàn)與顯微技術(shù)的不斷創(chuàng)新、發(fā)展分不開(kāi)。沒(méi)有顯微鏡的發(fā)明就不會(huì)有細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)，更不會(huì)有細(xì)胞學(xué)說(shuō)的建立。同樣，如果沒(méi)有電子顯微鏡的發(fā)明，人們就不會(huì)認(rèn)識(shí)到細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性。因此，顯微成像技術(shù)是生物學(xué)研究領(lǐng)域中一項(xiàng)常規(guī)的、不可缺少的技術(shù)手段之一。
從英國(guó)物理學(xué)家Hooke創(chuàng)制了第一架具有科學(xué)研究?jī)r(jià)值的顯微鏡到現(xiàn)今光、機(jī)、電一體化的各種高檔顯微鏡已有350多年的歷史了。為適應(yīng)不同需要，目前有各種類型的顯微鏡， 如可直接進(jìn)行解剖及觀察并具有立體感的體視顯微鏡；能觀察活細(xì)胞的相差顯微鏡、微分干涉顯微鏡；對(duì)于雙折射物質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究的偏光顯微鏡；既能作形態(tài)觀察，又能作定位、定性分析的熒光顯微鏡；組織培養(yǎng)不可缺少的長(zhǎng)工作距離的倒置顯微鏡；具高分辨率、可進(jìn)行顯微斷層掃描的激光掃描共聚焦顯微鏡等。2014年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授給了埃里克 貝齊格（Eric Betzig）、威廉 莫納（William E�� Moerner）和斯特凡 黑爾（Stefan W�� Hell） ，其主要的貢獻(xiàn)有：①超高分辨率光學(xué)顯微鏡STORM，使得在納米量級(jí)分辨率上對(duì)細(xì)胞和組織成像；②單分子熒光顯微鏡成像技術(shù)，這是顯微成像技術(shù)的巨大革命。
本章概述了幾種常用的光學(xué)顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡和電子顯微鏡的原理、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、應(yīng)用及獲得最佳觀察及采集圖像效果的實(shí)踐要點(diǎn)。