《免疫學實驗技術(shù)》系統(tǒng)地介紹了免疫學實驗技術(shù)的基礎知識、基本理論和基本技能。全書共分16個實驗,內(nèi)容包括凝集反應、沉淀反應、補體參與的免疫反應、免疫標記技術(shù)、免疫印跡、免疫細胞的分離與純化、細胞免疫功能測定、流式細胞測定技術(shù)、細胞分子及其受體的檢測、化學發(fā)光免疫分析、HLA分型技術(shù)、超敏反應、多克隆抗體的制備、單克隆抗體的制備、抗體的純化和非特異性免疫實驗等。書中詳細介紹了上述實驗的原理、材料、方法及實驗注意事項,內(nèi)容豐富、知識性強!睹庖邔W實驗技術(shù)》可作為基礎醫(yī)學、臨床醫(yī)學、口腔醫(yī)學、預防醫(yī)學、護理學、藥學及生物學等專業(yè)的免疫學實驗教材,同時也可作為從事免疫學及相關研究人員的參考用書。
實驗室守則
實驗一 凝集反應
一、直接凝集反應
(一)玻片凝集試驗——ABO血型鑒定
(二)試管凝集試驗
二、間接凝集試驗
(一)間接血球凝集試驗——血清類風濕因子測定
(二)間接凝集抑制試驗——妊娠試驗
(三)協(xié)同凝集試驗
實驗二 沉淀反應
一、瓊脂擴散試驗
(一)單向瓊脂擴散試驗
(二)雙向瓊脂擴散試驗
二、免疫電泳試驗
(一)對流免疫電泳試驗
(二)免疫電泳試驗
(三)火箭免疫電泳試驗
(四)交叉免疫電泳試驗
三、環(huán)狀沉淀試驗
實驗三 補體參與的免疫反應
一、溶血反應
二、補體結(jié)合試驗
(一)溶血素單位滴定
(二)補體單位滴定
(三)正式試驗
三、血清總補體含量的測定(CH50測定)
四、溶血空斑試驗
五、補體介導的細胞毒試驗
實驗四 免疫標記技術(shù)
一、酶免疫技術(shù)
(一)酶聯(lián)免疫吸附試驗
(二)酶免疫組織化學技術(shù)-PAP法(可溶性酶抗酶法)
二、熒光免疫技術(shù)
(一)直接(或間接)熒光免疫法檢測標本中的抗原
(二)間接熒光免疫法檢測人外周血中T淋巴細胞亞群
三、金免疫技術(shù)
(一)膠體金的制備
(二)免疫金的制備
(三)斑點免疫滲濾試驗
(四)斑點免疫層析試驗
四、放射免疫技術(shù)
實驗五 免疫印跡
一、蛋白質(zhì)的電泳分離
(一)樣本的制備
(二)蛋白質(zhì)凝膠電泳
二、將蛋白質(zhì)從凝膠中轉(zhuǎn)印至膜上
(一)以PVDF膜為固相載體的半干轉(zhuǎn)印法
(二)轉(zhuǎn)印后切取印跡膜
(三)印跡膜蛋白染色
三、免疫檢測
(一)印跡膜上非特異性蛋白質(zhì)結(jié)合位點的封閉
(二)直接與間接檢測方法
實驗六 免疫細胞的分離與純化
一、外周血液中白細胞的分離
(一)自然沉降法
(二)高分子聚合物沉降法
二、外周血液中單個核細胞的分離——密度梯度離心法
三、淋巴組織中淋巴細胞的分離
(一)脾細胞懸液的制備
(二)淋巴結(jié)細胞懸液的制備
(三)胸腺細胞懸液的制備
四、淋巴細胞的分離純化
(一)分離PMNC中的淋巴細胞和巨噬細胞
(二)T細胞、B細胞及T細胞亞群的分離純化
……
實驗七 細胞免疫功能測定
實驗八 流式細胞測定技術(shù)
實驗九 細胞因子及其受體的檢測
實驗十 化學發(fā)光免疫分析
實驗十一 HLA分型技術(shù)
實驗十二 超敏反應
實驗十三 多克隆抗體的制備及純化
實驗十四 單克隆抗體的制備
實驗十五 抗體的純化
實驗十六 非特異性免疫實驗
附錄