郭勇編著的《現(xiàn)代生化技術(shù)(第3版普通高等教育 十二五規(guī)劃教材)》是在1996年華南理工大學(xué)出版社 出版的《現(xiàn)代生化技術(shù)》和 2005年科學(xué)出版社出版的《現(xiàn)代生化技術(shù)》(第二版) 的基礎(chǔ)上，根據(jù)國內(nèi)外 生化技術(shù)的最新進(jìn)展和發(fā)展趨勢，結(jié)合作者的教學(xué)和 科研實(shí)踐，修改、補(bǔ)充 而成。主要介紹重要而又常用的各種現(xiàn)代生化技術(shù)的 技術(shù)原理和操作要 點(diǎn)。內(nèi)容包括三篇共15章，第一篇為生化分離技術(shù)， 包括提取與沉淀分離 技術(shù)、過濾與膜分離技術(shù)、萃取分離技術(shù)、層析分離 技術(shù)、電泳技術(shù)、離心分 離技術(shù)6章；第二篇為生化檢測技術(shù)，包括化學(xué)檢測 技術(shù)、光學(xué)檢測技術(shù)、酶 學(xué)檢測技術(shù)、氣體檢測技術(shù)、生物檢測技術(shù)、放射性 同位素檢測技術(shù)6章；第 三篇為酶、基因和細(xì)胞操作技術(shù)，包括酶操作技術(shù)、 基因操作技術(shù)、細(xì)胞操作 技術(shù)3章。每一章都有一節(jié)列出若干實(shí)驗，可供選擇 使用。
《現(xiàn)代生化技術(shù)(第3版普通高等教育十二五規(guī)劃 教材)》可供高等院校生物技術(shù)、生物工程、生物科 學(xué)、生物化工、發(fā)酵工 程、酶工程、生物制藥，以及其他有關(guān)學(xué)科的本科生 和研究生作為教材使用， 也可供有關(guān)專業(yè)的教學(xué)工作者、科研工作者和工程技 術(shù)人員參考使用。
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郭勇編著的《現(xiàn)代生化技術(shù)(第3版普通高等教育十二五規(guī)劃教材)》主要介紹重要而又常用的各種現(xiàn)代生化技術(shù)的技術(shù)原理和操作要點(diǎn)�！冬F(xiàn)代生化技術(shù)(第3版普通高等教育十二五規(guī)劃教材)》可供高等院校生物技術(shù)、生物工程、生物科學(xué)、生物化工、發(fā)酵工程、酶工程、生物制藥，以及其他有關(guān)學(xué)科的本科生和研究生作為教材使用，也可供有關(guān)專業(yè)的教學(xué)工作者、科研工作者和工程技術(shù)人員參考使用。
目錄
第三版前言
第二版前言
第一版前言
第一篇 生化分離技術(shù)
第一章 提取與沉淀分離技術(shù) 2
第一節(jié) 細(xì)胞破碎 2
一、機(jī)械破碎法 2
二、物理破碎法 3
三、化學(xué)破碎法 4
四、酶促破碎法 4
第二節(jié) 提取 4
一、提取的方法 5
二、影響提取的因素 6
第三節(jié) 沉淀分離 6
一、鹽析沉淀法 7
二、等電點(diǎn)沉淀法 10
三、有機(jī)溶劑沉淀法 10
四、復(fù)合沉淀法 11
五、金屬鹽沉淀法 11
六、選擇性變性沉淀法 12
第四節(jié) 實(shí)驗 12
實(shí)驗1-1 大腸桿菌細(xì)胞的超聲波破碎 12
實(shí)驗1-2 枯草桿菌堿性磷酸酶的提取與鹽析 13
實(shí)驗1-3 枯草桿菌DNA的提取與分離 14
實(shí)驗1-4 酵母RNA的提取與分離 15
實(shí)驗1-5 大蒜細(xì)胞SOD的提取與分離 16
實(shí)驗1-6 大鼠肝rRNA的提取與分離 17
第二章 過濾與膜分離技術(shù) 19
第一節(jié) 非膜過濾 19
一、非膜過濾的分類 19
二、非膜過濾的操作過程 20
第二節(jié) 膜分離技術(shù) 20
一、膜分離的分類 21
二、膜分離的操作過程及其控制 22
第三節(jié) 實(shí)驗 23
實(shí)驗2-1 胰凝乳蛋白酶的透析脫鹽 23
實(shí)驗2-2 糖化酶的超濾分離 24
第三章 萃取分離技術(shù) 26
第一節(jié) 有機(jī)溶劑萃取 26
一、有機(jī)溶劑的選擇 26
二、有機(jī)溶劑萃取的操作過程 26
第二節(jié) 雙水相萃取 27
三、雙水相萃取的原理 27
二、雙水相萃取的操作過程 27
第三節(jié) 超臨界萃取 28
一、超臨界萃取的原理 29
二、超臨界萃取的操作過程 29
第四節(jié) 反膠束萃取 31
一、反膠束萃取的原理 31
二、反膠束萃取的操作過程 31
第五節(jié) 實(shí)驗 32
實(shí)驗3-1 青蒿素的超臨界萃取分離 32
實(shí)驗3-2 人生長激素的雙水相萃取分離 33
實(shí)驗3-3 穿心蓮內(nèi)酯的有機(jī)溶劑萃取 34
第四章 層析分離技術(shù) 35
第一節(jié) 吸附層析 35
一、吸附層析原理 35
二、吸附柱層析 36
三、聚酰胺薄膜層析 39
四、其他吸附層析 39
第二節(jié) 分配層析 39
一、紙層析 40
二、薄層層析 43
三、氣相層析 45
第二節(jié) 離子交換層析 52
一、離子交換劑的選擇與處理 53
二、離子交換層析的操作過程 54
第四節(jié) 凝膠層析 55
一、凝膠層析的摹本原理 55
二、凝膠的選擇與處理 57
三、凝膠層析操作過程 58
第五節(jié) 親和層析 60
一、親和層析母體和配越 60
一、親和層析方法 61
第六節(jié) 層析聚焦 62
一、交換劑和緩沖液體系 63
二、pH梯度的形成 63
三、層析聚焦的操作過程 63
第七節(jié) 實(shí)驗 64
實(shí)驗4-1 蛋白質(zhì)溶液的凝膠層析脫鹽 64
實(shí)驗4-2 氨基酸的紙層析 64
實(shí)驗4-3 核苷酸的離子交換層析 66
實(shí)驗4-4 胰蛋白酶的親和層析 68
實(shí)驗4-5 凝膠層析測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 69
實(shí)驗4-6 DNS-氨基酸的聚酰胺薄膜層析 70
實(shí)驗4-7 醇酯成分的氣相層析 72
實(shí)驗4-8 膽酸混合液的薄層層析 74
第五章 電泳技術(shù) 75
第一節(jié) 電泳的基本原理 75
第二節(jié) 紙電泳 76
一、緩沖液的選擇 76
二、濾紙的選擇與剪裁 76
三、電泳操作要點(diǎn) 76
第三節(jié) 薄層電泳 78
第四節(jié) 薄膜電泳 78
第五節(jié) 凝膠電泳 79
一、聚丙烯酰胺凝膠的制備原理 79
二、不連續(xù)電泳中樣品壓縮成層的原理 80
三、SDS-凝膠電泳原理 81
四、凝膠電泳的操作要點(diǎn) 81
第六節(jié) 等電點(diǎn)聚焦電泳 82
一、穩(wěn)定pH梯度的形成 83
二、兩性電解質(zhì)載體 83
三、支持pH梯度的介質(zhì) 83
四、等電點(diǎn)聚焦電泳的操作要點(diǎn) 84
第七節(jié) 實(shí)驗 85
實(shí)驗5-1 核苷酸的紙電泳 85
實(shí)驗5-2 蛋白質(zhì)的醋酸纖維薄膜電泳 86
實(shí)驗5-3 DNA的瓊脂糖凝膠電泳 87
實(shí)驗5-4 蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠電泳 88
實(shí)驗5-5 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 90
實(shí)驗5-6 蛋白質(zhì)的二元凝膠電泳 91
第六章 離心分離技術(shù) 94
第一節(jié) 離心機(jī)的選擇 94
一、常速離心機(jī) 94
二、高速離心機(jī) 94
三、超速離心機(jī) 94
第二節(jié) 離心方法的選擇 95
一、差速離心 95
二、密度梯度離心 96
三、等密度梯度離心 97
第三節(jié) 離心條件的確定 98
一、離心力 98
二、離心時間 98
二、溫度 99
四、pH 99
第四節(jié) 實(shí)驗 99
實(shí)驗6-1 細(xì)菌核糖體的分離 99
實(shí)驗6 2 大腸桿菌細(xì)胞膜的分離 100
實(shí)驗6-3 RNA的蔗糖密度梯度離心分離 101
實(shí)驗6 4 大鼠肝細(xì)胞核的分離 102
第二篇 生化檢測技術(shù)
第七章 化學(xué)檢測技術(shù) 104
第一節(jié) 糖類的化學(xué)檢測 104
一、藍(lán)-愛農(nóng)法 104
二、斐林試劑快速法 105
三、次碘酸鈉法 106
四、銅試劑法 107
第二節(jié) 蛋白質(zhì)和氨基酸的化學(xué)檢測 108
三、定氮法測定蛋白質(zhì)的含量 108
二、雙縮脲試劑法測定蛋白質(zhì)含量 109
二、福林酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量 109
四、蛋白質(zhì)N端氨基酸丹磺�；瘻y定法 110
五、蛋白質(zhì)的氨基酸排列順序測定——埃德曼分析法 111
六、蛋白質(zhì)N端氨基酸2，4-二硝基氟苯測定法 113
七、茚三酮顯色法測定氨基酸含量 115
八、甲醛滴定法測定氨基酸 116
第三節(jié) 蛋白質(zhì)的免疫化學(xué)檢測 116
一、基本概念與原理 116
二、蛋白質(zhì)的免疫化學(xué)檢測方法 117
第四節(jié) 核酸的化學(xué)檢測 118
一、定磷法測定核酸含量 118
二、二苯胺法測定DNA含量 119
三、地衣酚法測定RNA含量 119
第五節(jié) 實(shí)驗 120
實(shí)驗7-1 斐林試劑置換法測定還原糖 120
實(shí)驗7-2 葡萄糖淀粉酶的活力測定 121
實(shí)驗7-3 微量凱氏定氮法測定總氮量 122
實(shí)驗7-4 福林酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量 124
實(shí)驗7-5 肘磺�；ǚ治龅鞍踪|(zhì)N端氨基酸 124
實(shí)驗7-6 異硫氰酸苯酯分析法測定肽鏈的氨基酸排列次序 125
實(shí)驗7-7 茚三酮顯色法測定氨基酸含量 127
實(shí)驗7-8 雙向免疫擴(kuò)散法測定抗血清效價 128
實(shí)驗7-9 定磷法測定核酸含量 129
實(shí)驗7-10 地衣酚顯色法測定核糖核酸(RNA)含量 130
實(shí)驗7-11 二苯胺顯色法測定DNA含量 131
第八章 光學(xué)檢測技術(shù) 132
第一節(jié) 旋光檢測技術(shù) 132
一、原理 132
二、操作要點(diǎn) 133
第二節(jié) 熒光檢測技術(shù) 133
一、鄰苯二甲醛熒光分析法測定氨基酸 133
二、熒光胺熒光分析法測定肽含量 134
第二節(jié) 分光光度檢測技術(shù) 135
一、原理 135
二、操作要點(diǎn) 136
第四節(jié) 實(shí)驗 137
實(shí)驗8-1 旋光法測定味精的純度 137
實(shí)驗8-2 熒光法測定核黃素含量 138
實(shí)驗8-3 熒光法測定氨基酸含量 139
實(shí)驗8-4 紫外線吸收法測定核酸含量 139
實(shí)驗8-5 紫外線吸收法測定蛋白質(zhì)含量 140
第九章 酶學(xué)檢測技術(shù) 141
第一節(jié) 酶學(xué)檢測技術(shù)的特點(diǎn) 141
一、酶學(xué)檢測的專一性強(qiáng) 141
二、酶學(xué)檢測的靈敏度高 141
三、酶學(xué)檢測的速度快 141
四、酶學(xué)檢測的條件溫和 141
第二節(jié) 酶法分析技術(shù) 142
一、酶法分析的基本過程 142
二、常用于酶法分析的酶及其檢測方法 142
第三節(jié) 酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù) 144
一、ELISA的基本原理 144
二、ELISA常用的標(biāo)記酶 144
二、常用的ELISA方法 146
四、ELISA技術(shù)的應(yīng)用 147
第四節(jié) 實(shí)驗 148
實(shí)驗9-1 利用酶法分析測定雞蛋中總膽固醇的含量 148
實(shí)驗9-2 利用酶法分析快速測定發(fā)酵液中的L-乳酸 149
實(shí)驗9-3 利用酶法分析測定發(fā)酵液中葡萄糖的濃度 151
實(shí)驗9-4 酶聯(lián)免疫吸附檢測法（雙抗體夾心法）檢測艱難梭菌毒素 152
實(shí)驗9-5 酶聯(lián)免疫吸附檢測法（間接法）測定兔血清免疫球蛋白IgG 153
第十章 氣體檢測技術(shù) 155
第一節(jié) 華勃氏呼吸儀檢壓法 156
第二節(jié) 范？斯萊克檢測儀測定α-氨基酸含量 158
第二節(jié) 實(shí)驗 158
實(shí)驗10-1 酵母細(xì)胞耗氧量的測定 158
實(shí)驗10-2 華勃氏呼吸儀測定L-谷氨酸脫羧酶活力 159
實(shí)驗10-3 華勃氏呼吸儀測定L-谷氨酸含量 160
第十一章 生物檢測技術(shù) 162
第一節(jié) 安全性試驗 162
一、毒性試驗 162
二、局部刺激性試驗 163
三、溶血試驗 163
網(wǎng)、熱原試驗 163
五、過敏試驗 164
第二節(jié) 生長抑制物質(zhì)的生物效價測定 164
一、稀釋法 165
二、擴(kuò)散法 165
第三節(jié) 生長促進(jìn)物質(zhì)的生物效價檢測 167
一、稀釋法 167
二、擴(kuò)散法 167
三、比濁法 167
四、滴定法 167
第四節(jié) 實(shí)驗 168
實(shí)驗11-1 卡那霉素的效價測定 168
實(shí)驗11-2 二環(huán)素的殺菌能力測定 169
實(shí)驗11 3 細(xì)胞病變抑制法測定干擾素的效價 170
實(shí)驗11-4 熱原試驗 171
第十二章 放射性同位素檢測技術(shù) 173
第一節(jié) 基本知識 173
一、放射性同位素 173
二、放射性同位素的衰變與射線 173
二、衰變規(guī)律 174
四、放射線的防護(hù) 174
第二節(jié) 放射性同位素的檢測 175
一、放射自顯影技術(shù) 175
二、蓋革計數(shù)管探測 176
三、閃爍計數(shù)器探測 177
第三節(jié) 放射性同位素的摻人 177
第四節(jié) 實(shí)驗 178
實(shí)驗12-1 γ-32P-ATP的酶促合成 178
實(shí)驗12-2 3H-蛋白質(zhì)的生物合成 179
實(shí)驗12-3 3H-蛋白質(zhì)凝膠的放射熒光最影 179
第三篇 酶、基因和細(xì)胞操作技術(shù)
第十三章 酶操作技術(shù) 182
第一節(jié) 酶生物合成的調(diào)節(jié) 技術(shù) 182
一、酶的誘導(dǎo)合成 182
二、酶生物合成的阻遏 184
第二節(jié) 酶反應(yīng)動力學(xué)的研究技術(shù) 185
一、酶反應(yīng)初速率的測定 185
二、底物濃度對反應(yīng)速率的影響——Km和Vmax的測定 185
三、最適溫度、熱穩(wěn)定性和活化能的測定 187
四、最適pH的測定 188
五、酶的激活與抑制 188
第三節(jié) 酶、細(xì)胞和原生質(zhì)體固定化技術(shù) 189
一、吸附法固定化技術(shù) 189
二、包埋法固定化技術(shù) 190
三、結(jié)合法固定化技術(shù) 191
四、交聯(lián)同定化技術(shù) 192
第四節(jié) 酶分子修飾技術(shù) 193
一、金屬離子置換修飾 193
二、大分了結(jié)合修飾 193
三、酶的側(cè)鏈基團(tuán)修飾 194
四、肽鏈有限水解修飾 196
五、核苷酸鏈的剪切修飾 197
六、氨基酸置換修飾 197
七、核苷酸置換修飾 198
八、酶分子的物理修飾 198
第五節(jié) 酶分子定向進(jìn)化技術(shù) 199
一、基因體外隨機(jī)突變技術(shù) 199
二、突變基因的高通量篩選技術(shù) 201
第六節(jié) 實(shí)驗 204
實(shí)驗13-1 β-半乳糖苷酶的誘導(dǎo)合成 204
實(shí)驗13-2 無機(jī)磷酸對枯草桿菌堿性磷酸酶生物合成的阻遏作用 205
實(shí)驗13-3 堿性磷酸酶的反應(yīng)動力學(xué)性質(zhì) 206
實(shí)驗13-4 L-谷氨酸脫羧酶的固定化 208
實(shí)驗13-5 枯草桿菌細(xì)胞固定化 209
實(shí)驗13-6 谷氨酸棒桿菌原生質(zhì)體同定化 209
實(shí)驗13-7 固定化原生質(zhì)體生產(chǎn)谷氨酸脫氫酶 210
實(shí)驗13-8 采用易錯PCR技術(shù)提高扁桃酸酯酶的立體選擇性 211
實(shí)驗13-9 利用DNA重排技術(shù)提高β-甘露聚糖酶的溫度耐受性 213
第十四章 基因操作技術(shù) 216
第一節(jié) 基因的獲取技術(shù) 216
一、分離法 216
二、反轉(zhuǎn)錄法 217
二、化學(xué)合成法 218
三、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù) 219
第二節(jié) 載體的制備技術(shù) 221
一、載體的分類 221
二、載體的制備 221
第三節(jié) DNA體外重組技術(shù) 223
一、黏性末端連接 223
二、平頭末端連接 224
三、修飾未端連接 225
第四節(jié) 重組DNA引入受體細(xì)胞技術(shù) 225
一、受體細(xì)胞的篩選與處理 225
二、外源DNA引入受體細(xì)胞 226
第五節(jié) 重組DNA的鑒定技術(shù) 227
一、DNA印跡技術(shù) 227
二、RNA印跡技術(shù) 228
三、蛋白質(zhì)印跡技術(shù) 228
四、DNA序列測定技術(shù) 229
第六節(jié) 實(shí)驗 232
實(shí)驗14-1 大腸桿菌ColE I三質(zhì)粒的分離 232
實(shí)驗14-2 重組DNA的細(xì)胞轉(zhuǎn)化 233
實(shí)驗14-3 Sanger測序法測定基因的序列 234
實(shí)驗14-4 DNA印跡雜交 235
實(shí)驗14-5 PCR擴(kuò)增目的基因 236
實(shí)驗14-6 堿裂解法提取質(zhì)粒DNA 237
第十五章 細(xì)胞操作技術(shù) 239
第一節(jié) 動物細(xì)胞融合技術(shù) 239
一、細(xì)胞的制備 239
二、細(xì)胞融合 240
三、融合子的篩選 240
第二節(jié) 原生質(zhì)體融合技術(shù) 241
一、原生質(zhì)體制備 241
二、原生質(zhì)體融合 244
三、細(xì)胞壁的再生 245
四、融合子的篩選 245
第三節(jié) 細(xì)胞拆合技術(shù) 246
一、細(xì)胞器的分離 246
二、細(xì)胞器重組 247
第四節(jié) 實(shí)驗 248
實(shí)驗15-1 枯草桿菌原生質(zhì)體的制備 248
實(shí)驗15-2 酵母原生質(zhì)體的分離與再生 249
實(shí)驗15-3 從胡蘿卜細(xì)胞分離原生質(zhì)體 250
實(shí)驗15-4 動物細(xì)胞微核體和胞質(zhì)體的制備 250
主要參考文獻(xiàn) 252
附錄 253
書單推薦
