目錄
叢書序
刖言
緒論 1
一、早期的無囷過濾技術(shù)（19世紀(jì)末） 1
二、早期的病毒培養(yǎng)和觀察（20世紀(jì)初至30年代） 1
三、細胞培養(yǎng)和疫苗開發(fā)（20世紀(jì)中后期） 2
四、基因工程技術(shù)（20世紀(jì)末） 3
五、新興技術(shù)(21世紀(jì)) 3
六、病毒檢測技術(shù)的發(fā)展歷程 4
第一篇 醫(yī)學(xué)病毒學(xué)實驗基礎(chǔ)
第一章 病原微生物實驗室生物安全 9
第一節(jié) 實驗室生物安全概述 9
第二節(jié) 實驗室生物安全防護等級 11
一、生物安全實驗室 11
二、實驗室生物安全防護要求 11
第三節(jié) 實驗室生物安全管理 15
一、實驗室生物安全管理原則 15
二、實驗室生物安全管理體系的組織架構(gòu) 16
三、實驗室生物安全管理制度體系 16
四、實驗室生物安全管理體系運行 17
第二章 病毒的檢測技術(shù) 18
第一節(jié) 病毒的樣本采集 18
一、采集樣本前做好標(biāo)記 20
二、樣本采集時間 20
三、樣本種類與部位 20
四、樣本處理和保存 20
五、血清學(xué)診斷樣本 20
六、保障生物安全 21
第二節(jié) 病毒的形態(tài)學(xué)檢查 21
一、電子顯微鏡檢測技術(shù) 21
二、光學(xué)顯微鏡檢測技術(shù) 22
第三節(jié) 病毒的分離培養(yǎng)與鑒定技術(shù) 22
一、病毒的分離培養(yǎng) 22
二、病毒的鑒定 23
三、病毒的定量測定 24
第四節(jié) 病毒的分子檢測技術(shù) 25
一、核酸分子檢測 25
二、蛋白質(zhì)分子檢測 27
第五節(jié) 病毒的免疫學(xué)檢測技術(shù) 28
一、免疫熒光技術(shù) 28
二、酶聯(lián)免疫技術(shù) 28
三、放射免疫測定技術(shù) 28
四、免疫印跡技術(shù) 29
五、免疫尉斤技術(shù) 29
第二篇 醫(yī)學(xué)病毒學(xué)實驗案例
第三章 病毒的消毒方法 33
第一節(jié) 攜帶報告基因的重組復(fù)制缺陷型腺病毒的構(gòu)建 33
一、重組腺病毒載體特征 33
二、重組腺病毒構(gòu)建 35
第二節(jié) 比較不同消毒方法對重組腺病毒的消毒效果 40
一、實驗?zāi)康?0
二二、實驗用品 40
三、實驗方法 40
四、實驗結(jié)果觀察與分析 41
第四章 流行性感冒病毒的分離、培養(yǎng)與鑒定 43
第一節(jié) 案例 44
第二節(jié) 樣本采集 44
一、樣本采集的安全防護措施 44
二、樣本采集的方法 44
第三節(jié) 流感病毒的分離培養(yǎng) 45
一、雞胚尿囊腔接種 45
二、MDCK細胞分離培養(yǎng) 47
第四節(jié) 流感病毒的鑒定 48
一、血凝試驗 48
二、血凝抑制試驗 50
三、流感病毒onestep RT-PCR檢測 51
四、流感病毒real-time one step RT-PCR方法.53
五、流感病毒的基因組測序 55
第五章 乙型肝炎病毒的檢測及常用的病毒學(xué)研究方法 57
第一節(jié) 案例 58
第二節(jié) 樣本采集 58
第三節(jié) HBV抗原及抗體檢測 59
一、實驗?zāi)康?59
二、實驗原理 59
三、實驗用品 60
四、實驗方法 61
五、實驗結(jié)果觀察與分析 64
第四節(jié) HBV DNA定量檢測 65
一、實驗?zāi)康?65
二、實驗原理 65
三、實驗用品 65
四、實驗方法 66
五、實驗結(jié)果觀察與分析 67
第五節(jié) HBV感染肝組織免疫組織化學(xué)分析 68
一、實驗?zāi)康?68
二、實驗原理 68
三、實驗用品 68
四、實驗方法 69
五、實驗結(jié)果觀察與分析 70
第六節(jié) HBV的其他檢測方法簡介 70
一、HBVcccDNA 的檢測 70
二、血清HBVRNA定量檢測 71
第六章 人類免疫缺陷病毒的檢測及常用的病毒學(xué)研究方法 72
第一節(jié) 案例 73
第二節(jié) 樣本采集 73
一、樣本來源 73
二、樣本采集步驟 74
第三節(jié) HIV篩查試驗（HIV抗原/抗體檢測） 76
一、酶聯(lián)免疫吸附試驗 77
二、化學(xué)發(fā)光免疫分析或免疫熒光試驗 79
三、快速檢測試驗 80
第四節(jié) HIV抗體確證試驗 81
一、免疫印跡檢測HIV抗體 81
二、重組/線性免疫印跡 82
第五節(jié) HIV病毒載量的檢測 82
一、分支DNA雜交技術(shù)檢測HIV病毒載量 83
二、核酸序列依賴性擴增技術(shù)檢測HIV病毒載量 84
三、實時熒光定量PCR檢測HIV病毒載量 85
第六節(jié) HIV中和試驗 86
第七節(jié) HIV的其他病毒學(xué)研究方法 88
一、HIV的分離培養(yǎng) 88
二、CD4+T淋巴細胞數(shù)量檢測 88
三、HIV耐藥性檢測 89
四、HIV儲存庫的檢測 89
五、臨床其他檢測方法 90
第七章 輪狀病毒的檢測及常用的病毒學(xué)研究方法 91
第一節(jié) 案例 92
一、案例概述 92
二、需要解決的問題 92
第二節(jié) 樣本采集 92
一、采集對象 92
二、采樣人員基本要求 93
三、樣本采集基本要求 93
四、采集樣本種類 93
第三節(jié) 輪狀病毒核酸檢測 94
一、實驗?zāi)康?94
二、實驗原理 94
三、實驗用品 94
四、實驗方法 95
五、實驗結(jié)果觀察與分析 96
第四節(jié) 輪狀病毒的分型方法 97
一、實驗?zāi)康?97
二、實驗原理 97
三、實驗用品 97
四、實驗方法 98
五、實驗結(jié)果觀察與分析 98
第五節(jié) 輪狀病毒的其他病毒學(xué)研究方法 99
一、電鏡檢測 99
二、免疫電鏡檢測 99
三、ELISA檢測 100
四、膠體金免疫層析試紙條法檢測 101
五、其他檢測方法 102
第八章 人乳頭瘤病毒的檢測及常用的病毒學(xué)研究方法 103
第一節(jié) 案例 103
第二節(jié) 樣本采集 104
一、采集對象 104
二、釆集方法 104
第三節(jié) 人乳頭瘤病毒的原位雜交實驗 105
一、實驗?zāi)康?105
二、實驗原理 105
三、實驗用品 105
四、實驗方法 105
五、實驗結(jié)果觀察與分析 106
第四節(jié) 人乳頭瘤病毒的斑點雜交實驗 107
一、實驗?zāi)康?107
二、實驗原理 107
三、實驗用品 107
四、實驗方法 108
五、實驗結(jié)果觀察與分析 108
第五節(jié) 人乳頭瘤病毒的分型基因芯片檢測 108
一、實驗?zāi)康?108
二、實驗原理 109
三、實驗用品 109
四、實驗方法 109
五、實驗結(jié)果觀察與分析 110
第九章 漢坦病毒的檢測及常用的病毒學(xué)研究方法 111
第一節(jié) 案例 111
第二節(jié) 樣本采集 111
一、樣本類型 112
二、采樣程序 112
三、注意事項 112
四、其他臨床數(shù)據(jù)采集 112
五、樣本處理 112
第三節(jié) 漢坦病毒抗體的檢測 112
一、實驗?zāi)康?112
二、實驗原理 112
三、實驗用品 113
四、實驗方法 113
五、實驗結(jié)果觀察與分析 114
第四節(jié) 漢坦病毒抗原的檢測 114
一、實驗?zāi)康?114
二、實驗原理 114
三、實驗用品 115
四、實驗方法 115
五、實驗結(jié)果觀察與分析 116
第五節(jié) 漢坦病毒核酸的檢測 116
一、實驗酬 116
二、實驗原理 116
三、實驗用品 117
四、實驗方法 117
五、實驗結(jié)果觀察與分析 118
第六節(jié) 漢坦病毒的其他病毒學(xué)研究方法 118
第十章 新發(fā)病毒性傳染病病原的分離與鑒定 119
第一節(jié) 案例 120
第二節(jié) 樣本采集 120
一、采集對象 120
二、采樣人員基本要求 120
三、采集樣本基本要求 120
四、采集樣本種類 121
第三節(jié) 新冠病毒的宏基因組測序 121
一、實驗酬 122
二、實驗原理 122
三、實驗用品 122
四、實驗方法 122
五、實驗結(jié)果觀察與分析 123
第四節(jié) 新冠病毒的分離培養(yǎng) 124
一、實驗酬 124
二、實驗原理 124
三、實驗用品 125
四、實驗方法 125
五、實驗結(jié)果觀察與分析 126
第五節(jié) 新冠病毒的核酸檢測 126
一、實驗酬 126
二、實驗原理 126
三、實驗用品 127
四、實驗方法 127
五、實驗結(jié)果觀察與分析 128
第六節(jié) 假病毒中和試驗 129
一、實驗酬 129
二、實驗原理 129
三、實驗用品 129
四、實驗方法 130
五、實驗結(jié)果觀察與分析 131
主要參考文獻 132
縮略詞 136