第1章 緒論 1.1 玉米矮花葉病研究進(jìn)展 1.1.1 病癥、危害及防治 1.1.2 致病病原及其生物學(xué)特性 1.1.3 抗病種質(zhì)篩選與抗性遺傳 1.1.4 結(jié)論 1.2 玉米致死性壞死病研究進(jìn)展 1.2.1 病癥、危害及防治 1.2.2 致病病原及其生物學(xué)特性 1.2.3 抗病種質(zhì)篩選與抗性遺傳 1.2.4 結(jié)論 1.3 植物抗病研究進(jìn)展 1.3.1 植物抗病尺基因 1.3.2 植物數(shù)量抗性位點(diǎn) 1.3.3 植物抗病機(jī)理 1.4 植物抗病毒分子機(jī)制研究進(jìn)展 1.4.1 植物RNA沉默介導(dǎo)的抗病機(jī)制 1.4.2 植物隱性基因介導(dǎo)的抗病機(jī)制 1.4.3 植物顯性基因介導(dǎo)的抗病機(jī)制 1.5 植物硫氧還蛋白研究進(jìn)展 1.5.1 植物中H型硫氧還蛋白的分類 1.5.2 植物中H型硫氧還蛋白的多重性與亞細(xì)胞定位 1.5.3 植物中H型硫氧還蛋白的氧化還原涪陛 1.5.4 植物中H型硫氧還蛋白的分子伴侶沿陛 1.5.5 植物中H型硫氧還蛋白的信號分子功能 1.5.6 H型硫氧還蛋白與植物抗病 1.6 玉米病毒病研究總結(jié) 第2章 玉米抗矮花葉病基因挖掘 2.1 材料 2.1.1 玉米材料 2.1.2 接種病原物 2.2 研究方法 2.2.1 人工接種病毒與表型鑒定 2.2.2 分子標(biāo)記開發(fā) 2.2.3 基因型鑒定 2.2.4 BAC文庫篩選及覆蓋Scmvl的BAC重疊群構(gòu)建 2.2.5 BAC序列分析與候選基因預(yù)測 2.2.6 候選基因表達(dá)的半定量檢測 2.3 結(jié)果與分析 2.3.1 兩個(gè)F6代重組自交系群體中Scmvl區(qū)段的驗(yàn)證 2.3.2 利用兩個(gè)F6代重組自交系群體進(jìn)一步精細(xì)定位 2.3.3 BAC文庫篩選及覆蓋Scmvl區(qū)段的BAC重疊群構(gòu)建 2.3.4 候選基因的預(yù)測 2.3.5 候選基因的確定 2.4 結(jié)論與討論 第3章 硫氧還蛋白編碼基因的克隆與序列特征分析 3.1 玉米材料與主要試劑 3.1.1 玉米材料 3.1.2 主要試劑 3.2 研究方法 3.2.1 玉米葉片總DNA提取 3.2.2 玉米葉片總RNA提取 3.2.3 硫氧還蛋白編碼基因的DNA及cDNA片段擴(kuò)增引物設(shè)計(jì) 3.2.4 硫氧還蛋白編碼基因DNA片段的PCR擴(kuò)增 3.2.5 硫氧還蛋白編碼基因的全長cDNA獲得 3.2.6 硫氧還蛋白編碼基因的生物信息學(xué)分析 3.3 結(jié)果與分析 3.3.1 玉米抗病自交系葉片組織總cDNA及RNA的提取 3.3.2 硫氧還蛋白編碼基因DNA及cDNA擴(kuò)增引物 3.3.3 硫氧還蛋白編碼基因的DNA及全長cDNA擴(kuò)增 3.3.4 硫氧還蛋白編碼基因的生物信息學(xué)分析 3.4 結(jié)論與討論 第4章 硫氧還蛋白基因介導(dǎo)玉米矮花葉病抗性 4.1 材料與試劑 4.1.1 玉米材料 4.1.2 載體、菌株及主要試劑 4.2 研究方法 4.2.1 互補(bǔ)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化 4.2.2 互補(bǔ)轉(zhuǎn)基因植株的基因型及抗性鑒定 4.2.3 RNA干擾載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化 4.3 結(jié)果與分析 4.3.1 BAC克隆及互補(bǔ)載體的大量酶切 4.3.2 互補(bǔ)表達(dá)載體的構(gòu)建及驗(yàn)證 4.3.3 互補(bǔ)表達(dá)載體重組質(zhì)粒的鑒定 4.3.4 互補(bǔ)轉(zhuǎn)基因植株的獲得及功能互補(bǔ)驗(yàn)證 4.3.5 RNA干擾載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化 4.4 結(jié)論與討論 第5章 硫氧還蛋白介導(dǎo)的抗玉米矮花葉病分子機(jī)理 5.1 材料及試劑 5.1.1 玉米材料 5.1.2 載體及主要試劑 5.2 研究方法 5.2.1 亞細(xì)胞定位所需溶液配制 5.2.2 亞細(xì)胞定位載體的構(gòu)建 5.2.3 亞細(xì)胞定位步驟 5.2.4 SCMV病毒粒子及RNA提取 5.2.5 玉米原生質(zhì)體瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)建立 5.3 結(jié)果與分析 5.3.1 硫氧還蛋白的亞細(xì)胞定位 5.3.2 ZmTrxh瞬時(shí)過量表達(dá)對SCMVRNA的影響 5.4 結(jié)論與討論 第6章 硫氧還蛋白基因介導(dǎo)的玉米致死性壞死病抗性效應(yīng) 6.1 材料及主要試劑 6.1.1 玉米材料 6.1.2 接種病原及主要試劑儀器 6.2 研究方法 6.2.1 抗性材料篩選及優(yōu)勢類群的劃分 6.2.2 玉米自交系中硫氧還蛋白編碼基因的鑒定及抗性表現(xiàn) 6.2.3 硫氧還蛋白介導(dǎo)的玉米致死性壞死病抗性分析 6.3 結(jié)果與分析 6.3.1 抗性種質(zhì)資源收集與篩選 6.3.2 有無QTL-Scmvl抗病位點(diǎn)對抗性影響的鑒定 6.3.3 引入QTL-Scmvl抗病位點(diǎn)的玉米新材料創(chuàng)制 6.3.4 引入QTL-Scmvl抗病位點(diǎn)的玉米新材料的抗性鑒定 6.3.5 玉米致死性壞死病病級劃分及抗病評價(jià) 6.4 結(jié)論與討論 第7章 總結(jié)和展望 7.1 總結(jié) 7.1.1 玉米矮花葉病抗病基因挖掘 7.1.2 硫氧還蛋白編碼基因的克隆及序列特性分析 7.1.3 硫氧還蛋白基因介導(dǎo)玉米矮花葉病抗性 7.1.4 硫氧還蛋白介導(dǎo)的玉米矮花葉病抗病分子機(jī)制 7.1.5 硫氧還蛋白基因介導(dǎo)玉米致死性壞死病抗性的分析 7.2 展望 參考文獻(xiàn) 附表 本研究所使用的引物信息