第1章 緒論
1.1 農業(yè)廢物堆肥化概述
1.1.1 農業(yè)廢物
1.1.2 堆肥與堆肥化
1.1.3 農業(yè)廢物堆肥化
1.2 堆肥化中毒莠定的檢測
1.2.1 農業(yè)廢物中的農藥殘留
1.2.2 毒莠定的結構與特征
1.2.3 毒莠定的檢測
1.3 堆肥化中的木質纖維素
1.3.1 木質纖維素的組成和結構
1.3.2 木質素的生物降解
1.3.3 木質素降解微生物
1.3.4 木質素降解酶及編碼基因
1.4 DNA生物傳感器
1.4.1 生物傳感器
1.4.2 電化學DNA生物傳感器
1.4.3 絲網(wǎng)印刷生物傳感器
1.4.4 木質纖維素降解酶及基因的傳感器檢測
1.5 本書研究的意義與內容
1.5.1 研究意義
1.5.2 研究內容
第2章 間接競爭酶聯(lián)免疫吸附法檢測土壤及堆肥的毒莠定
2.1 前言
2.2 實驗部分
2.2.1 試劑與設備
2.2.2 偶聯(lián)抗原和抗體的制備
2.2.3 酶標二抗(HRP-羊抗兔IgG)工作濃度的優(yōu)化
2.2.4 毒莠定抗體濃度(稀釋度)的優(yōu)化
2.2.5 毒莠定的間接競爭ELISA
2.2.6 土壤浸出液的回收實驗
2.2.7 堆肥實際樣品中的應用
2.3 結果與討論
2.3.1 酶標二抗(HRP-羊抗兔IgG)工作濃度的優(yōu)化
2.3.2 抗體濃度的優(yōu)化
2.3.3 間接競爭USA的標準曲線
2.3.4 土壤浸出液的回收實驗
2.3.5 堆肥實際樣品中的應用結果
2.4 本章小結
第3章 金電極自組裝木質素過氧化物酶基因分子膜的制備及電化學傳感檢測
3.1 前言
3.2 實驗部分
3.2.1 試劑和儀器
3.2.2 金電極的制備及預處理
3.2.3 基因探針的設計及雜交模型的建立
3.2.4 捕獲探針在金電極上的固定
3.2.5 雜交和檢測
3.2.6 自組裝膜修飾金電極的再生
3.3 結果與討論
3.3.1 自組裝時間與響應信號的關系
3.3.2 捕獲探針S濃度的優(yōu)化
3.3.3 信號探針S最佳響應濃度
3.3.4 雜交溫度的優(yōu)化
3.3.5 雜交時間的優(yōu)化
3.3.6 兩種緩沖溶液pH的優(yōu)化
3.3.7 金電極雜交檢測的電化學表征
3.3.8 修飾電極的線性檢測范圍
3.3.9 自組裝膜修飾金電極的再生性能
3.4 本章小結
第4章 聚合酶鏈反應-核酸雜交傳感技術檢測堆肥卻基因
4.1 前言
4.2 實驗部分
4.2.1 試劑與儀器
4.2.2 基因探針和PCR引物的設計以及雜交模型的構建
4.2.3 黃孢原毛平革茵的培養(yǎng)和DNA提取
4.2.4 雜交傳感檢測洳基因PCR產(chǎn)物
4.2.5 雜交傳感檢測的特異性
4.2.6 兩種辣根過氧化物酶標記的性能對比
4.2.7 堆肥樣品中木質素過氧化物酶編碼基因檢測
4.3 結果與討論
4.3.1 雜交傳感檢測的特異性
4.3.2 HRP-A與HRP-SA的性能對比
4.3.3 堆體溫度變化曲線
4.3.4 凝膠電泳分析和聚合酶鏈反應
4.3.5 幻基因PCR產(chǎn)物檢測
4.4 本章小結
第5章 絲網(wǎng)印刷基因分子膜雜交傳感檢測堆肥漆酶編碼基因
5.1 前言
5.2 實驗部分
5.2.1 試劑和儀器
5.2.2 鳳尾側耳的培養(yǎng)和DNA提取
5.2.3 基因探針和PCR引物
5.2.4 漆酶酶活的測定
5.2.5 絲網(wǎng)印刷電極的制備
5.2.6 電化學檢測
5.2.7 雜交傳感檢測lac基因PCR產(chǎn)物
5.3 結果與討論
5.3.1 漆酶酶活動態(tài)變化分析及DNA濃度測定
5.3.2 瓊脂糖凝膠電泳分析
5.3.3 絲網(wǎng)印刷基因分子膜電化學表征
5.3.4 傳感檢測特異性
5.3.5 lac基因PCR產(chǎn)物檢測
5.4 本章小結
第6章 結論
參考文獻