生物工程開放實驗和專業(yè)實驗教學可以培養(yǎng)學生對問題的分析能力、設計開發(fā)能力、研究能力和工程實踐能力,可以增強學生的綜合素質和創(chuàng)新能力。河北工業(yè)大學化工學院生物工程系結合教學和科研工作,在生物工程開放實驗、基因工程實驗和專業(yè)實驗講義的基礎上,考慮到內容的實用性、前瞻性和創(chuàng)新性,增加了內容的完整性、連貫性和系統(tǒng)性,編成此教材。本書共分五章:第一章包含十一個核酸研究與基因重組的基礎實驗;第二章包含五個細胞培養(yǎng)與發(fā)酵實驗;第三章包含四個蛋白質的分離純化與鑒定實驗;第四章包含五個酶學實驗;第五章包含五個生物活性物質的分離及鑒定實驗。本教材適用于生物化工、生物工程、生物技術、制藥工程和食品工程等專業(yè)本科生開放實驗、基因工程實驗和專業(yè)實驗。
張愛利,河北工業(yè)大學化工學院生物工程系,副教授,承擔過《生物化學》、《分子生物學》、《生物工程開放實驗》、《微生物學》、《生物工程研究型實驗》、認識實習和畢業(yè)實習等教學任務。一直從事釀酒酵母細胞信號轉導、合成生物學和發(fā)酵工程等方面的研究。主持了2 項國家自然科學基金項目(No. 21206028、No.21978065)、1 項教育部博士點基金項目(No. 20121317120014)、1 項河北省自然科學基金項目(No.B2013202288)、1 項河北省高等學校科學技術研究項目(No.q2012024)和1項教育部“春暉計劃”合作科研項目(No.Z2017012)等科研項目。在釀酒酵母Ras-cAMP 信號通路調控細胞生長及衰老的分子機制、醇類燃料生物合成機制及優(yōu)化方面取得了一定的學術成果和創(chuàng)新。
第一章核酸研究與基因重組實驗001
實驗一細菌總DNA的制備和分光光度法定量002
實驗二質粒DNA的提取和凝膠電泳檢測006
實驗三酵母染色體DNA的提取及驗證實驗011
實驗四PCR擴增DNA片段和電泳檢測015
實驗五DNA重組實驗019
實驗六DNA電轉化大腸桿菌實驗023
實驗七DNA轉化酵母實驗026
實驗八酵母RNA的提取及甲醛變性凝膠電泳029
實驗九Northern 雜交實驗036
實驗十酵母等位基因的分離及遺傳分析040
實驗十一細菌三親本雜交實驗044
第二章細胞培養(yǎng)與發(fā)酵實驗047
實驗一植物原生質體的分離048
實驗二植物愈傷組織培養(yǎng)和分化實驗050
實驗三細菌生長曲線的測定053
實驗四酵母菌搖瓶發(fā)酵和培養(yǎng)056
實驗五酵母發(fā)酵罐培養(yǎng)和發(fā)酵過程控制059
第三章蛋白質的分離純化與鑒定065
實驗一酵母總蛋白的快速提取及濃度測定066
實驗二蛋白質的聚丙烯酰胺凝膠電泳071
實驗三蛋白質免疫印跡實驗075
實驗四凝膠色譜法分離純化蛋白質實驗081
第四章酶學實驗087
實驗一有機磷降解酶產(chǎn)生菌發(fā)酵條件優(yōu)化088
實驗二淀粉酶發(fā)酵條件優(yōu)化093
實驗三重組β-葡萄糖苷酶比活力的測定097
實驗四脂肪酶的固定化及其酶活力測定103
實驗五脂肪酶交聯(lián)酶聚集體的制備及活性檢測107
第五章生物活性物質的分離及鑒定111
實驗一HPLC法測定發(fā)酵液中葡萄糖和乙醇含量112
實驗二等電點沉淀法分離維生素B2116
實驗三多元萃取體系萃取發(fā)酵液中林可霉素120
實驗四超臨界萃取青蒿素和HPLC鑒定124
實驗五木質纖維素的分級分離與表征128
附錄133