本書重點在生物樣品的處理與分析方法,包括生物樣品的制備,分離、沉淀、吸附,色譜、電泳、結晶與干燥等。注重理論與實際操作,基本方法介紹、基本原理、儀器設備的操作與維護、問題分析。主題包括過濾、離心、沉淀、萃取、膜分離、吸附與離子交換、液相色譜、電泳分離分析技術,同時增加了近年來興起的磁分離、免疫分析和微芯片分析前沿分析技術。適合生物及化學等相關專業(yè)研究生和本科生閱讀,以及作為相關專業(yè)技術知識普及的參考書。
屈鋒,北京理工大學,教授,研究方向為生物醫(yī)學分析檢測和生物分離。研究內容涉及:蛋白質與核酸分析及相互作用;核酸適配體篩選;蛋白質組學分析方法;細胞活性分析及毒性物質評價;微生物特性及分析檢測。主持和承擔的主要項目科研項目有:973《蛋白質分析鑒定新技術與新方法》;科技部“十一五”科技支撐計劃《高通量蛋白質分離檢測系統(tǒng)的研制與開發(fā)》;國家自然科學基金面上項目《基于模式病原菌全細胞核酸適配體的毛細管電泳篩選方法研究》等。
第1章 緒論
1.1 生物技術的發(fā)展與生物分離 001
1.1.1 生物分離工程的概念 001
1.1.2 生物分離技術的發(fā)展歷程 002
1.2 生物分離產品的特點 003
1.3 生物分離技術的基本原理 004
1.4 生物分離流程和技術的多樣性 006
1.5 生物分離效率評價 006
1.6 生物分析檢測技術 008
1.7 生物分離分析技術的發(fā)展趨勢 009
思考題 009
第2章 過濾和離心
2.1 概述 010
2.2 過濾 011
2.2.1 傳統(tǒng)過濾 011
2.2.2 新型膜過濾 016
2.3 離心 016
2.3.1 概述 016
2.3.2 離心法 017
2.3.3 離心機 024
思考題 027
第3章 細胞破碎
3.1 細胞的結構 028
3.1.1 細菌細胞壁 028
3.1.2 酵母細胞壁 029
3.1.3 植物細胞壁 029
3.2 細胞破碎方法 030
3.2.1 機械破碎法 031
3.2.2 非機械破碎法 033
3.3 細胞破碎方法比較及選擇 036
思考題 037
第4章 沉淀分離
4.1 概述 038
4.2 蛋白質的表面特性和沉淀 039
4.3 沉淀分離法 040
4.3.1 鹽析法 040
4.3.2 有機溶劑沉淀法 044
4.3.3 等電點沉淀法 046
4.3.4 親和沉淀 046
4.3.5 其它沉淀法 047
4.3.6 選擇性變性沉淀法 048
4.4 沉淀分離法的應用實例 049
思考題 051
第5章 萃取分離
5.1 萃取和反萃取 052
5.1.1 萃取 052
5.1.2 反萃取 053
5.2 分配定律 054
5.3 有機溶劑萃取 055
5.3.1 物理萃取和化學萃取 055
5.3.2 有機溶劑萃取的影響因素 056
5.3.3 溶劑萃取操作方式 057
5.4 液-固萃取 060
5.4.1 索氏提取 060
5.4.2 快速溶劑萃取 061
5.4.3 微波輔助萃取 061
5.4.4 超聲萃取 063
5.5 超臨界流體萃取 065
5.5.1 超臨界流體的概念及特點 065
5.5.2 超臨界流體萃取劑 065
5.5.3 超臨界流體萃取方式 067
5.5.4 超臨界流體萃取的特點 067
5.5.5 超臨界流體萃取的應用 068
5.6 雙水相萃取 069
5.6.1 雙水相體系的發(fā)現 069
5.6.2 雙水相體系的形成 069
5.6.3 雙水相體系的組成 070
5.6.4 雙水相體系的相圖 070
5.6.5 雙水相中的分配平衡 071
5.6.6 影響分配平衡的因素 072
5.6.7 雙水相萃取分離的優(yōu)勢 074
5.6.8 雙水相萃取的工藝 074
5.6.9 雙水相萃取的應用 075
5.6.10 雙水相萃取技術的發(fā)展 077
5.7 液膜萃取 079
5.7.1 液膜的概念及分類 080
5.7.2 液膜的分離機理 082
5.7.3 液膜的組成及對萃取的影響 084
5.7.4 影響液膜萃取效率的其它因素 085
5.7.5 液膜萃取操作 086
5.7.6 液膜萃取的應用 088
5.8 反膠團萃取 090
5.8.1 膠團與反膠團 090
5.8.2 反膠團萃取 092
5.8.3 反膠團萃取的方式 095
5.8.4 反膠團萃取的應用 096
思考題 097
第6章 膜分離
6.1 膜分離概述 098
6.1.1 膜分離技術發(fā)展歷史 098
6.1.2 膜分離的概念及特點 099
6.2 膜分離法及原理 100
6.2.1 透析 100
6.2.2 反滲透 100
6.2.3 納濾 101
6.2.4 超濾和微濾 102
6.2.5 電滲析 103
6.2.6 滲透氣化 103
6.3 膜材料及其特性 104
6.3.1 膜材料 104
6.3.2 膜結構及特性 105
6.4 膜組件結構和特點 108
6.4.1 管式膜組件 108
6.4.2 平板式膜組件 109
6.4.3 螺旋卷式膜組件 109
6.4.4 中空纖維式(毛細管式)膜組件 109
6.5 影響膜分離速度的主要因素 110
6.5.1 液流方向和流速 110
6.5.2 壓力 111
6.5.3 料液濃度 111
6.6 膜污染與清洗 111
6.6.1 膜污染的原因和危害 111
6.6.2 膜污染的清洗 112
6.7 膜分離的應用 113
6.7.1 菌體細胞分離 113
6.7.2 小分子物質的回收 113
6.7.3 蛋白質的回收、濃縮與純化 113
6.7.4 功能膜過濾 114
6.7.5 膜生物反應器 114
思考題 115
第7章 吸附與離子交換
7.1 吸附的分類 116
7.1.1 物理吸附 116
7.1.2 化學吸附 117
7.1.3 離子交換吸附 117
7.2 吸附分離介質 117
7.2.1 吸附劑 117
7.2.2 離子交換劑 118
7.3 吸附與離子交換的基本理論 121
7.3.1 吸附等溫線 121
7.3.2 影響吸附的主要因素 122
7.3.3 離子交換平衡理論 123
7.4 生物分子的吸附類型 125
7.5 吸附分離工藝 126
7.5.1 分批式與連續(xù)式吸附 126
7.5.2 固定床吸附 127
7.5.3 流化床吸附 128
7.5.4 膨脹床吸附 128
7.6 膨脹床技術的應用 131
思考題 132
第8章 液相色譜
8.1 液相色譜分離概述 134
8.1.1 液相色譜的基本概念 134
8.1.2 液相色譜法分類 137
8.1.3 液相色譜的加樣和洗脫 138
8.2 液相色譜分離原理 139
8.2.1 離子交換色譜 139
8.2.2 疏水作用色譜 142
8.2.3 反相色譜 143
8.2.4 凝膠過濾色譜 146
8.2.5 親和色譜 150
8.3 高效液相色譜 158
8.3.1 基本原理與特點 158
8.3.2 高效液相色譜儀 158
8.3.3 超高效液相色譜 161
8.3.4 多維液相色譜 163
8.3.5 制備型液相色譜 166
思考題 182
第9章 電泳
9.1 電泳發(fā)展簡史 183
9.2 電泳分離基本原理及影響因素 184
9.2.1 電泳分離基本原理 184
9.2.2 電泳分離的影響因素 185
9.3 電泳法分類和分離模式 187
9.3.1 區(qū)帶電泳 187
9.3.2 等電聚焦電泳 188
9.3.3 等速電泳 188
9.3.4 凝膠電泳 189
9.3.5 雙向電泳(二維電泳) 195
9.3.6 毛細管電泳 196
9.3.7 自由流電泳 200
思考題 201
第10章 磁分離
10.1 物質的磁性 202
10.1.1 順磁性 202
10.1.2 反磁性 202
10.1.3 鐵磁性 203
10.2 分離用磁性納米粒子的結構和特性 203
10.2.1 磁性納米粒子概述 203
10.2.2 磁性納米粒子的結構和特性 203
10.3 磁性納米粒子的制備方法 204
10.4 磁分離方法及應用 206
10.4.1 磁分離在生物分離中的應用 206
10.4.2 磁分離在環(huán)境工程中的應用 209
思考題 211
第11章 免疫分析
11.1 抗原和抗體的性質及來源 212
11.1.1 抗原和半抗原 212
11.1.2 抗體的性質和來源 213
11.1.3 抗體的純化和表征 214
11.1.4 抗原抗體反應特點及影響因素 216
11.2 酶聯免疫吸附分析法 216
11.2.1 基本原理 216
11.2.2 ELISA方法分類 217
11.2.3 ELISA中的信號放大 219
11.2.4 ELISA的應用 220
11.3 側流免疫分析 220
11.3.1 側流免疫分析試紙條的組成 221
11.3.2 膠體金側流免疫分析的原理 222
11.3.3 膠體金側流免疫分析的應用 225
思考題 230
第12章 微芯片分析
12.1 生物芯片 232
12.1.1 生物芯片分析原理 232
12.1.2 生物芯片的特點 233
12.1.3 生物芯片分類 233
12.1.4 生物芯片的應用 234
12.2 微流控芯片 235
12.2.1 微流控芯片發(fā)展歷程 235
12.2.2 微流控芯片中微流體的特性 236
12.2.3 微流控芯片材料 237
12.2.4 微流控芯片的應用 237
思考題 241
參考文獻 242