近年來,隨著科學技術(shù)的進步,大量先進儀器和技術(shù)的采用,醫(yī)學檢驗得到飛速的發(fā)展。各種新的檢驗技術(shù)不斷涌現(xiàn),對臨床疾病的診療越來越重要,作用越來越突出,為人類疾病的診斷、治療監(jiān)測、預后判斷提供大量新的實驗室監(jiān)測指標。據(jù)統(tǒng)計,臨床實驗室提供的醫(yī)學檢驗信息占患者全部診療信息的60%以上,醫(yī)學檢驗已成為醫(yī)療的重要組成部分,被稱為臨床醫(yī)學中的“偵察兵”。為了更好地適應(yīng)醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)的教學發(fā)展和需求,體現(xiàn)新的教學理念和特色,在認真、廣泛調(diào)研的基礎(chǔ)上,在醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學指導委員會相關(guān)領(lǐng)導和專家的指導和支持下,華中科技大學出版社組織了全國40多所醫(yī)藥院校的200多位老師編寫了本套全國高等醫(yī)藥院校醫(yī)學檢驗專業(yè)“十三五”規(guī)劃教材。
(1) 教材定位準確,體現(xiàn)新教學理念,反映新教學成果。緊密聯(lián)系新的教學大綱和臨床實踐,注重基礎(chǔ)理論和臨床實踐相結(jié)合,體現(xiàn)高素質(zhì)復合型人才培養(yǎng)的要求。(2) 適應(yīng)新世紀醫(yī)學教育模式的要求,注重學生的臨床實踐技能、初步科研能力和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。突出實用性和針對性,以臨床應(yīng)用為導向,同時反映相關(guān)學科的前沿知識和發(fā)展趨勢。(3)以問題為導向,導入臨床案例。通過案例與提問激發(fā)學生學習的熱情,以學生為中心,以利于學生主動學習。(4) 紙質(zhì)數(shù)字,融合發(fā)展。全套教材教材采用全新編寫模式,以掃描二維碼形式幫助老師及學生在移動終端共享優(yōu)質(zhì)配套網(wǎng)絡(luò)資源,通過使用我社數(shù)字化教學資源平臺將移動互聯(lián)、網(wǎng)絡(luò)增值、慕課等新的教學理念和學習方式融入教材建設(shè)中,開發(fā)多媒體教材、數(shù)字化教材等新媒體教材形式。
近年來,隨著科學技術(shù)的進步,大量先進儀器和技術(shù)的采用,醫(yī)學檢驗得到飛速的發(fā)展。各種新的檢驗技術(shù)不斷涌現(xiàn),對臨床疾病的診療越來越重要,作用越來越突出,為人類疾病的診斷、治療監(jiān)測、預后判斷提供大量新的實驗室監(jiān)測指標。據(jù)統(tǒng)計,臨床實驗室提供的醫(yī)學檢驗信息占患者全部診療信息的60%以上,醫(yī)學檢驗已成為醫(yī)療的重要組成部分,被稱為臨床醫(yī)學中的“偵察兵”。
《國家中長期教育改革和發(fā)展規(guī)劃綱要(2010—2020年)》《國家中長期人才發(fā)展規(guī)劃綱要(2010—2020年)》要求全面提高高等教育水平和人才培養(yǎng)質(zhì)量,以更好地滿足我國經(jīng)濟社會發(fā)展和創(chuàng)新型國家建設(shè)的需要。根據(jù)《教育部關(guān)于進一步深化本科教學改革全面提高教學質(zhì)量的若干意見》,在教材建設(shè)過程中,教育部鼓勵編寫、出版適應(yīng)不同類型高等學校教學需要的不同風格和特色的教材;積極推進高等學校與行業(yè)合作編寫教材;鼓勵編寫和出版不同載體和不同形式的教材,包括紙質(zhì)教材和數(shù)字化教材。2012年教育部制定的新本科專業(yè)目錄中,將醫(yī)學檢驗專業(yè)更名為醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè),學制由五年改為四年。
為了更好地適應(yīng)醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)的教學發(fā)展需求,體現(xiàn)新的教學理念和特色,在認真、廣泛調(diào)研的基礎(chǔ)上,在醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學指導委員會相關(guān)領(lǐng)導和專家的指導和支持下,華中科技大學出版社組織了全國40多所醫(yī)藥院校的200多位老師編寫了本套高等醫(yī)藥院校醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)創(chuàng)新型系列教材。本套教材由國*級重點學科的教學團隊引領(lǐng),副教授及以上職稱的老師占80%,教齡在20年以上的老師占72%。教材編寫過程中,全體參編人員進行了充分的研討,各參編單位高度重視并大力支持教材的編寫工作,各主編及參編人員付出了辛勤的勞動,這確保了本套教材的編寫質(zhì)量。
本套教材著重突出以下特點:
(1) 教材定位準確,體現(xiàn)新教學理念,反映新教學成果。緊密聯(lián)系新的教學大綱和臨床實踐,注重基礎(chǔ)理論和臨床實踐相結(jié)合,體現(xiàn)高素質(zhì)復合型人才培養(yǎng)的要求。
(2) 適應(yīng)新世紀醫(yī)學教育模式的要求,注重學生的臨床實踐技能、初步科研能力和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。突出實用性和針對性,以臨床應(yīng)用為導向,同時反映相關(guān)學科的前沿知識和發(fā)展趨勢。
(3) 以問題為導向,導入臨床案例。通過案例與問題激發(fā)學生學習的熱情,以學生為中心,以利于學生主動學習。
(4) 紙質(zhì)與數(shù)字融合發(fā)展。全套教材采用全新編寫模式,以掃描二維碼形式幫助老師及學生在移動終端共享優(yōu)質(zhì)配套網(wǎng)絡(luò)資源,通過使用華中科技大學出版社數(shù)字化教學資源平臺將移動互聯(lián)、網(wǎng)絡(luò)增值、慕課等新的教學理念和學習方式融入教材建設(shè)中,開發(fā)多媒體教材、數(shù)字化教材等新媒體教材形式。
本套教材得到了教育部高等學校醫(yī)學技術(shù)類專業(yè)教學指導委員會和中國醫(yī)師協(xié)會檢驗醫(yī)師分會相關(guān)領(lǐng)導和專家,以及各院校的大力支持與高度關(guān)注,我們衷心希望這套教材能為高等醫(yī)藥院校醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學及人才培養(yǎng)做出應(yīng)有的貢獻。我們也相信這套教材在使用過程中,通過教學實踐的檢驗和實際問題的解決,能不斷得到改進、完善和提高。
高等醫(yī)藥院校醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)創(chuàng)新型系列教材
建設(shè)指導委員會臨床分子生物學檢驗技術(shù)的高速發(fā)展,極大地推動了現(xiàn)代檢驗醫(yī)學的進步,臨床分子生物學實驗室成為臨床實驗室的一個重要組成部分,臨床分子生物學檢驗項目已廣泛應(yīng)用于感染、遺傳、腫瘤等,以及個體遺傳標記等方面的檢查。為了適應(yīng)醫(yī)學檢驗教育發(fā)展的需要,華中科技大學出版社于2013年啟動、組織編寫了《臨床分子診斷學實驗》。此書得到了各高校醫(yī)學檢驗專業(yè)老師和同學們的肯定和認可。由于醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)學制的“五改四”,對醫(yī)學檢驗教育提出了新要求,華中科技大學出版社于2018年再次啟動該書第2版編寫工作。為了使教材更能反映專業(yè)特點,經(jīng)編委會研究決定,將第2版實驗教材更名為《臨床分子生物學檢驗技術(shù)實驗指導》,并作為伊正君教授、楊清玲教授等編寫的《臨床分子生物學檢驗技術(shù)》(理論教材)的配套教材。建議實驗教學學時為30~60學時。
為使教材既體現(xiàn)學科發(fā)展的趨勢和突出臨床的應(yīng)用,又充分考慮各個醫(yī)藥院校的教學實際情況,指導教學改革的發(fā)展方向,使教材具有實用性、規(guī)范性、兼容性和延展性,第2版在第1版的基礎(chǔ)上進行了較大修改和更新。在教材編寫內(nèi)容上,強調(diào)基礎(chǔ)理論和基礎(chǔ)知識的同時,側(cè)重培養(yǎng)學生綜合分析問題和解決臨床實際問題的能力,使其更好地理解和掌握臨床分子生物學檢驗技術(shù)的特點和應(yīng)用,從而使教材具有廣泛的適用性,既是學生在校學習的“臨床分子生物學檢驗技術(shù)”的實驗指導教材,又可作為學生醫(yī)院見習、實習及醫(yī)學科研工作者的重要參考書籍。
本書共分為四章,包含四十六個實驗項目。第一章主要介紹臨床分子生物學檢驗技術(shù)實驗基本知識。在第一版的基礎(chǔ)上,不僅增加了實驗室的基本規(guī)則,還增加了實驗過程學習要求、實驗報告撰寫要求,以及實驗過程質(zhì)量測評等內(nèi)容,以適應(yīng)醫(yī)學教育發(fā)展的要求,提高實踐教學形成性評價的可操作性。第二章主要介紹臨床分子生物學檢驗技術(shù)基本技能實驗。增加了生物芯片技術(shù)、生物信息分析技術(shù)等實驗內(nèi)容,以提高專業(yè)知識技能的全面性。第三章主要介紹臨床分子生物學檢驗技術(shù)綜合性實驗,目的是培養(yǎng)學生綜合應(yīng)用能力和臨床實踐能力。實驗項目較第一版有較大的變化,以臨床常規(guī)開展的項目為主。第四章為臨床分子生物學檢驗技術(shù)創(chuàng)新性實驗設(shè)計,主要為學生開展臨床分子生物學方面的研究提供基本的研究方案,培養(yǎng)學生的創(chuàng)新能力。附錄為臨床分子生物學實驗常用試劑與緩沖液的配制。每個實驗項目內(nèi)容包括:教學目標、實驗原理、器材與試劑(含自配與試劑盒)、實驗操作流程、注意事項、結(jié)果分析、臨床應(yīng)用(或臨床案例分析)、思考題等。本書可滿足具有不同實驗室條件的院校使用,方便教師根據(jù)實際情況從中選做實驗。
在本書編寫過程中,得到了廣州醫(yī)科大學、河北北方學院、濰坊醫(yī)學院等單位的大力支持,編委們以高度的責任感完成了各自的編寫任務(wù),付出了辛勤的勞動,在此一并表示衷心的感謝。由于臨床分子生物學檢驗技術(shù)發(fā)展非常迅速,加之編者水平有限,難免存在不足之處或錯誤,敬請同行專家及讀者批評指正。
廣州醫(yī)科大學 ,教授,主任醫(yī)師,全國高等醫(yī)藥院校臨床生物化學與分子診斷學理事會常務(wù)理事、廣東省醫(yī)院協(xié)會臨床實驗室管理專業(yè)委員會副主任委員、廣東省醫(yī)師協(xié)會檢驗醫(yī)師分會常委。
第一章臨床分子生物學檢驗技術(shù)實驗基本知識/1
第一節(jié)臨床分子生物學檢驗技術(shù)實驗室管理規(guī)程/1
第二節(jié)臨床分子生物學檢驗技術(shù)實驗操作基本知識/5
第三節(jié)實驗操作技能學習要求與考評/9
第二章臨床分子生物學檢驗技術(shù)基本技能實驗/13
第一節(jié)核酸的分離與純化/13
實驗一質(zhì)粒DNA的提取與純化/13
實驗二基因組DNA的分離與純化/16
實驗三RNA的提取與純化/19
第二節(jié)核酸的鑒定與分析/24
實驗四紫外吸收法鑒定核酸的濃度和純度/24
實驗五核酸濃度熒光微量檢測/27
實驗六核酸片段的瓊脂糖凝膠電泳/29
實驗七核酸片段的聚丙烯酰胺凝膠電泳/32
第三節(jié)聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)/35
實驗八常規(guī)PCR檢測方法/35
實驗九RTPCR檢測方法/39
實驗十實時熒光定量PCR檢測方法/42
第四節(jié)印跡技術(shù)/47
實驗十一Southern blot技術(shù)/47
實驗十二Northern blot技術(shù)/51
實驗十三Western blot技術(shù)/54
第五節(jié)生物芯片技術(shù)/59
實驗十四基因芯片/59
實驗十五蛋白質(zhì)芯片/64
第六節(jié)核酸測序技術(shù)/68
實驗十六雙脫氧鏈終止測序法/68
實驗十七焦磷酸測序法/73
實驗十八高通量測序法/75
第七節(jié)生物信息分析技術(shù)/82
實驗十九引物設(shè)計方法/82
實驗二十序列比對分析/84
實驗二十一分子系統(tǒng)發(fā)育分析/86
實驗二十二基因功能與通路分析/89
第八節(jié)分子克隆技術(shù)/93
實驗二十三感受態(tài)細胞的制備/93
實驗二十四DNA重組與轉(zhuǎn)化/95
實驗二十五重組子的篩選與鑒定/97
實驗二十六重組基因的誘導表達與檢測/103
第三章臨床分子生物學檢驗技術(shù)綜合性實驗/108
第一節(jié)感染性疾病的臨床分子生物學檢驗/108
實驗二十七乙型肝炎病毒(HBV)基因定量檢測/108
實驗二十八甲型流感病毒(H1N1)基因定性檢測/111
實驗二十九人乳頭瘤病毒(HPV)基因分型檢測/115
實驗三十結(jié)核分枝桿菌的檢測/118
第二節(jié)遺傳性疾病的分子生物學檢驗/122
實驗三十一地中海貧血基因檢測/122
實驗三十二肌營養(yǎng)不良相關(guān)基因檢測/127
實驗三十三強直性脊柱炎基因檢測/130
實驗三十四遺傳性耳聾相關(guān)基因檢測/132
第三節(jié)腫瘤疾病的臨床分子生物學檢驗/136
實驗三十五Her2基因表達水平分析/136
實驗三十六EGFR基因突變檢測/140
實驗三十七白血病融合基因BCRABL的檢測/143
實驗三十八循環(huán)腫瘤細胞檢測/146
第四節(jié)藥物基因的臨床分子生物學檢驗/151
實驗三十九華法林代謝基因檢測/151
實驗四十葉酸代謝基因檢測/154
第五節(jié)個體遺傳標記和染色體異常的臨床分子生物學檢驗/157
實驗四十一STR基因座分型/158
實驗四十二HLA基因分型/161
實驗四十三21三體異常的分子診斷/163
第四章臨床分子生物學檢驗技術(shù)創(chuàng)新性實驗/168
實驗四十四流感病毒分子流行病學分析/168
實驗四十五熒光定量PCR高分辨率熔解曲線分析檢測
基因點突變/170
實驗四十六熒光素酶報告基因的制備/172
附錄常用試劑與緩沖液的配制/174
主要參考文獻/179
彩圖/183