《生物化學實驗(工科專業(yè)適用)》是在西華大學“生物化學(工科)”省級精品課程建設的基礎上,邀請同行專家集體編寫而成。在精選實驗項目上體現了以下教學目的:
一,生物化學實驗基本操作技能的訓練,如生化實驗中常用儀器的使用、生物物質的分離、純化、分析技術等。通過這些實驗,使學生掌握生物化學的基本操作技術,為后續(xù)課程的實驗、畢業(yè)論文以及將來的科研和實際工作打好基礎。
二,基礎生物化學實驗的掌握,如糖、蛋白質、核酸等的性質實驗、代謝實驗,分子生物學基礎實驗等內容。通過這些實驗,使學生加深對課堂知識的理解,進一步掌握生物物質的特點和規(guī)律,以及在工業(yè)生產中的應用。
三,綜合運用知識能力的培養(yǎng)。為適應素質教育、創(chuàng)新教育的需要,《高等學校專業(yè)教材·生物化學實驗(工科專業(yè)適用)》在傳統(tǒng)生物化學實驗的基礎上,增加了綜合性、設計性實驗的內容,在教師的指導下,由學生根據已有知識,自己設計實驗方案,嘗試自己分析實驗結果,進一步培養(yǎng)學生的綜合應用能力、分析與設計能力、邏輯思維能力。
四,工程意識和工程能力的培養(yǎng)。突出工科專業(yè)特點是《高等學校專業(yè)教材·生物化學實驗(工科專業(yè)適用)》的特色與亮點,我們在實驗項目的選擇、實驗材料與預處理方法的確定、結果與數據處理等方面,盡可能結合相關工業(yè)生產的實際問題,理論聯系實際,在培養(yǎng)基本技能的同時,培養(yǎng)學生解決實際工程問題的能力,潛移默化地強化學生的工程意識。
生物化學是生命科學領域中活躍的分支學科之一,其實驗方法和技術是生物化學發(fā)展的重要組成部分。掌握生物化學實驗的基本原理和操作技術,對包括食品科學與工程、制藥工程、環(huán)境工程等專業(yè)在內的工程專業(yè)的學生是必不可少的,而且對于培養(yǎng)學生的科學精神、科研及實際工作能力、分析問題與解決問題的能力等都是非常重要的。
《高等學校專業(yè)教材·生物化學實驗(工科專業(yè)適用)》共分概論,基礎生物化學實驗,綜合性實驗、設計性實驗和附錄等部分!陡叩葘W校專業(yè)教材·生物化學實驗(工科專業(yè)適用)》可供工程類的生物工程、食品科學與工程、環(huán)境工程、輕化工程等工科專業(yè)作為本科生物化學實驗課教材,也可供其他專業(yè)的學生、相關專業(yè)的研究生和工程技術人員參考。
第一章 概論
第一節(jié) 實驗室基本常識
一、生物化學實驗室安全與防護常識
二、生物化學實驗的基本要求
第二節(jié) 生物化學實驗基本操作
一、實驗室常用儀器的使用
二、生物化學的分離、純化、分析技術概述
第二章 基礎生物化學實驗
第一節(jié) 生命物質化學實驗
實驗1 糖的呈色反應和定性鑒定
實驗2 植物中還原糖和總糖的測定——3,5-二硝基水楊酸比色法
實驗3 種子粗脂肪的提取
實驗4 血清膽固醇的測定——磷硫鐵法
實驗5 紙層析法分離鑒定氨基酸
實驗6 谷物種子中賴氨酸含量的測定
實驗7 蛋白質的性質實驗
實驗8 蛋白質含量測定——雙縮脲法、考馬斯亮藍法、紫外分光光度法
實驗9 血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳
實驗10 正交法測定幾種因素對酶活力的影響
實驗11 枯草桿菌蛋白酶活力測定
實驗12 脲酶km值的簡易測定
實驗13 細胞色素c的制備及測定
實驗14 核酸含量的測定
實驗15 維生素A的測定——比色法
第二節(jié) 生命物質代謝實驗
實驗16 脂肪酸的口一氧化
實驗17 多酚氧化酶的純化和活力測定
實驗18 酪蛋白的制備
實驗19 SDS-PAGE電泳測定蛋白質相對分子質量
實驗20 胰島素和腎上腺素對血糖濃度的影響
實驗21 肝糖原的提取與鑒定
第三節(jié) 核酸化學實驗
實驗22 離子交換柱層析分離核苷酸
實驗23 酵母RNA的提取及組分鑒定
實驗24 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗25 質粒DNA的微量提取、純化
實驗26 植物中DNA的提取
實驗27 聚合酶鏈式反應
第三章 綜合性實驗
實驗28 血清γ-球蛋白的分離、純化與鑒定
實驗29 酪氨酸酶的提取及其酶促反應動力學研究
實驗30 固定化酵母細胞及蔗糖酶的檢測
實驗31 發(fā)酵過程中無機磷的利用和ATP的生成(ATP的生物合成)
實驗32 兔抗人血清抗體的制備和效價測定
實驗33 有機廢水的COD測定
第四章 設計性實驗
實驗34 蛋白質的制備及其含量的測定
實驗35 茶葉中茶多酚類物質的提取與含量測定
實驗36 天然產物中多糖的提取、純化與鑒定
實驗37 蛋白質的表達、分離、純化和鑒定
附錄
一、試劑配制的一般注意事項
二、玻璃儀器的洗滌方法
三、實驗樣品的準備
四、常用緩沖液的配制
五、實驗室中常用參數
參考文獻
第一章 概論
第一節(jié) 實驗室基本常識
一、生物化學實驗室安全與防護常識
1. 實驗室安全
在生物化學實驗中,經常要與有腐蝕性、易燃、易爆性和毒性很強的化學藥品及有潛在危害性的生物材料直接接觸,經常要用到煤氣、水、電,因此,安全操作是一個至關重要的問題。
(1)熟悉實驗室煤氣總閥、水閥門及電閘門所在處。離開實驗室時,一定要將室內檢查一遍,應將水、電、煤氣的開關關好。
(2)熟悉如何處理著火事故。在可燃液體燃著時,應立刻轉移著火區(qū)內的一切可燃物質。酒精及其他可溶于水的液體著火時,可用水滅火;乙醚、甲苯等有機溶劑著火時,應用石棉布或沙土撲滅。
(3)了解化學藥品的警告標志
(4)實驗操作過程中凡遇到能產生煙霧、有毒性或腐蝕性氣體時,應在通風櫥中進行。
(5)使用毒性物質和致癌物質必須根據試劑瓶上標簽說明嚴格操作,安全稱量、轉移和保管。操作時應戴手套,必要時戴口罩或防毒面罩,并在通風櫥中進行。沾過毒性、致癌物的容器應單獨清洗、處理。
(6)廢液,特別是強酸和強堿不能直接倒在水槽中,應先稀釋、然后倒入水槽,再用大量自來水沖洗水槽及下水道。
(7)生物材料如微生物、動物組織和血液都可能存在細菌和病毒感染的潛伏性危險,因此處理各種生物材料必須謹慎、小心,做完實驗后必須用肥皂、洗滌劑或消毒液洗凈雙手。
(8)進行遺傳重組的實驗時應根據有關規(guī)定加強生物安全的防范措施。
2.實驗室應急處理
(1)在生物化學實驗中,如發(fā)生受傷事故,應立即適當地采取急救措施:如不慎被玻璃割傷或其他機械損傷,應先檢查傷口內有無玻璃或金屬等物碎片,然后用硼酸水洗凈,再涂擦碘酒或紅汞水,必要時用紗布包扎。若傷口較大或過深,應迅速在傷口上部和下部扎緊血管止血,送醫(yī)院診治。
(2)輕度燙傷時一般可涂上苦味酸軟膏。如果傷處紅痛(一級灼傷),可擦醫(yī)用橄欖油;若皮膚起泡(二級灼傷),不要弄破水泡,防止感染;若燙傷皮膚呈棕色或黑色(三級灼傷),應用干燥無菌的消毒紗布輕輕包扎好,急送醫(yī)院治療。
(3)皮膚不慎被強酸、溴、氯氣等物質灼傷時,應用大量自來水沖洗,然后再用5%的碳酸氫鈉溶液洗滌。
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