目錄
上篇 基本實驗
第一章 顯微鏡的構(gòu)造和使用 1
實驗1-1 普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、使用方法及細(xì)胞基本形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察 1
實驗1-2 倒置相差顯微鏡的構(gòu)造與使用 5
實驗1-3 顯微鏡測微尺的使用 8
第二章 流式細(xì)胞儀技術(shù)與應(yīng)用 14
實驗2-1 流式細(xì)胞儀結(jié)構(gòu)原理及應(yīng)用 14
實驗2-2 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期 18
實驗2-3 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡 19
實驗2-4 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞中抗原——流式細(xì)胞術(shù)檢測T淋巴細(xì)胞亞群 21
第三章 細(xì)胞器結(jié)構(gòu)的觀察與分離 24
實驗3-1 細(xì)胞器結(jié)構(gòu)的觀察 24
實驗3-2 細(xì)胞器分級分離 31
第四章 細(xì)胞化學(xué)方法和細(xì)胞化學(xué)成分顯示 34
實驗4-1 細(xì)胞化學(xué)基本理論 34
實驗4-2 細(xì)胞中骨架蛋白的顯示與細(xì)胞形態(tài)的觀察 37
實驗4-3 Feulgen法顯示脫氧核糖核酸 39
實驗4-4 甲基綠-派洛寧顯示核酸 41
實驗4-5 蘇木素-伊紅染色顯示細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì) 42
第五章 酶細(xì)胞化學(xué) 45
實驗5-1 酶細(xì)胞化學(xué)的基本原理 45
實驗5-2 堿性磷酸酶顯示及用途 47
實驗5-3 聯(lián)苯胺法顯示過氧化物酶及應(yīng)用 49
實驗5-4 詹納斯綠顯示活體細(xì)胞線粒體 50
實驗5-5 利用琥珀酸脫氫酶活性進行MTT檢測細(xì)胞相對存活率 51
實驗5-6 CCK8檢測技術(shù) 53
第六章 免疫化學(xué)技術(shù) 56
實驗6-1 免疫酶細(xì)胞化學(xué)法檢測髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中P65蛋白的表達 56
實驗6-2 免疫熒光染色顯示髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中HES1蛋白的分布 58
實驗6-3 免疫組織化學(xué)法檢測HES1在胃癌組織中的表達與分布 60
第七章 細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù) 64
實驗7-1 人類性染色質(zhì)標(biāo)本的制備與觀察 64
實驗7-2 人外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)與染色體制備 66
實驗7-3 小鼠骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備與觀察 69
實驗7-4 染色體G顯帶技術(shù) 70
實驗7-5 核型分析 74
第八章 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 77
實驗8-1 細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 77
實驗8-2 細(xì)胞的原代培養(yǎng) 84
實驗8-3 傳代細(xì)胞培養(yǎng) 85
實驗8-4 培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)觀察和計數(shù) 87
實驗8-5 細(xì)胞凍存、復(fù)蘇與運輸 90
實驗8-6 細(xì)胞克隆化培養(yǎng) 92
實驗8-7 細(xì)胞三維培養(yǎng) 94
第九章 細(xì)胞行為學(xué) 99
實驗9-1 細(xì)胞吞噬實驗 99
實驗9-2 細(xì)胞融合實驗 101
實驗9-3 細(xì)胞周期 106
實驗9-4 小鼠減數(shù)分裂 109
實驗9-5 細(xì)胞周期特定時相細(xì)胞同步化方法 113
實驗9-6 細(xì)胞運動的觀察 116
實驗9-7 腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲試驗——Transwell小室測定法 118
第十章 細(xì)胞衰老和凋亡的檢測 120
實驗10-1 蘇木素-伊紅染色法顯示凋亡細(xì)胞 120
實驗10-2 Giemsa染色法顯示凋亡細(xì)胞 122
實驗10-3 凋亡細(xì)胞的原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記法（TUNEL法） 123
實驗10-4 細(xì)胞凋亡的瓊脂糖凝膠電泳檢測 125
實驗10-5 細(xì)胞衰老的檢測 127
第十一章 蛋白質(zhì)的分離與測定 129
實驗11-1 真核細(xì)胞蛋白質(zhì)提取 129
實驗11-2 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)濃度 131
實驗11-3 福林-酚法測定蛋白質(zhì)濃度 132
實驗11-4 考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度 134
實驗11-5 蛋白質(zhì)印跡免疫分析（Western blot） 135
第十二章 核酸的分離、測定與分析 139
實驗12-1 真核生物組織及細(xì)胞基因組DNA提取 139
實驗12-2 組織及細(xì)胞中RNA的提取 140
實驗12-3 DNA與RNA含量測定 142
實驗12-4 聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）體外擴增DNA片段 143
實驗12-5 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR） 145
實驗12-6 實時定量PCR（Real time-PCR） 148
下篇 綜合實驗
第十三章 小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng) 152
實驗13-1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞的培養(yǎng) 152
實驗13-2 飼養(yǎng)層細(xì)胞的制備 154
實驗13-3 小鼠胚胎干細(xì)胞的分離及培養(yǎng) 155
第十四章 IL-6剝奪誘導(dǎo)小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系7TD1細(xì)胞凋亡、觀察及檢測 157
實驗14-1 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系7TD1細(xì)胞復(fù)蘇與傳代培養(yǎng) 158
實驗14-2 7TD1細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)（IL-6剝奪）及細(xì)胞收集 160
實驗14-3 IL-6剝奪誘導(dǎo)7TD1細(xì)胞凋亡的形態(tài)特征觀察 161
實驗14-4 IL-6剝奪誘導(dǎo)7TD1細(xì)胞凋亡的DNA提取及凋亡梯狀帶檢測 164
第十五章 觀察白藜蘆醇對髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化、運動、凋亡的影響及相關(guān)基因的檢測 168
實驗15-1 細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代 168
實驗15-2 白藜蘆醇處理前后細(xì)胞數(shù)量和形態(tài)的觀察以及免疫細(xì)胞化學(xué)染色 170
實驗15-3 白藜蘆醇對髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞遷移能力的影響 172
實驗15-4 總RNA提取和分化相關(guān)基因突觸素（synaptophysin）的RT-PCR檢測 173
第十六章 小鼠表皮細(xì)胞原代培養(yǎng)及免疫熒光檢測 175
實驗16-1 細(xì)胞原代培養(yǎng)（消化法） 175
實驗16-2 細(xì)胞傳代 176
實驗16-3 細(xì)胞的處理及免疫熒光法檢測E-cadherin 177
實驗16-4 細(xì)胞的顯微攝影 179
第十七章 應(yīng)用基因重組技術(shù)在真核細(xì)胞中表達和檢測p53基因 182
實驗17-1 目的基因p53 PCR擴增及瓊脂糖凝膠電泳檢測 183
實驗17-2 目的基因p53片段純化回收與重組表達載體連接、轉(zhuǎn)化、篩選及重組質(zhì)粒提取 184
實驗17-3 培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染目的基因表達載體 187
實驗17-4 Western blot方法檢測外源目的基因p53表達 188
附錄 191
附錄一 試劑濃度的表示方法及其計算 191
附錄二 常用人工合成細(xì)胞培養(yǎng)基的種類、化學(xué)組成及適用細(xì)胞 193
附錄三 實驗室常用細(xì)胞系（株） 196
附錄四 離心機轉(zhuǎn)數(shù)與離心力的換算表 199