本書整合細胞生物學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)4門課程的實驗內(nèi)容,刪除驗證性實驗,精簡基礎(chǔ)性實驗,加強問題(或案例)為引導(dǎo)的綜合性實驗和探究性實驗。本書包括四篇內(nèi)容,第一篇為醫(yī)學(xué)生物學(xué)技術(shù)基本原理,包括顯微鏡與細胞微觀結(jié)構(gòu)、生物大分子制備與分離技術(shù)、分光光度技術(shù)、放射性同位素技術(shù)和人類染色體的識別。同時還包括實驗誤差與數(shù)據(jù)處理的內(nèi)容。第二篇為基礎(chǔ)性實驗,共14個,重在培養(yǎng)學(xué)生的基本操作技能。第三篇為綜合性實驗,共18個,重在培養(yǎng)學(xué)生綜合運用不同實驗技術(shù)解決問題的能力。第四篇為2個探究性實驗的例子,作為開展探究性實驗的參考,在其后附注了實驗設(shè)計基本原則。最后的附錄部分包括實驗須知、實驗記錄及實驗報告的書寫、細胞生物學(xué)繪圖、常用元素原子量表、實驗室常用酸堿的比重和濃度等內(nèi)容。
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目錄
第一篇 醫(yī)學(xué)生物學(xué)技術(shù)基本原理
第一章 顯微鏡與細胞的微觀結(jié)構(gòu) 1
第一節(jié) 普通光學(xué)顯微鏡 1
第二節(jié) 細胞的超微結(jié)構(gòu) 9
第二章 生物大分子制備與分離技術(shù) 14
第一節(jié) 生物大分子的基本制備技術(shù) 14
第二節(jié) 層析技術(shù) 19
第三節(jié) 電泳技術(shù) 29
第四節(jié) 離心技術(shù) 39
第三章 分光光度技術(shù) 42
第四章 放射性同位素技術(shù) 46
第五章 人類染色體的識別 52
第六章 實驗誤差與數(shù)據(jù)處理 57
第二篇 基礎(chǔ)性實驗
實驗一 細胞的基本形態(tài)結(jié)構(gòu) 62
實驗二 細胞的顯微結(jié)構(gòu)與超微結(jié)構(gòu) 67
實驗三 細胞計數(shù)與顯微測量 72
實驗四 HEK293細胞的傳代培養(yǎng)、凍存與復(fù)蘇 76
實驗五 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細胞的原代培養(yǎng) 80
實驗六 比色法測定蛋白質(zhì)的含量 83
實驗七 紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量 88
實驗八 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測定未知蛋白質(zhì)的分子量 90
實驗九 兔肝基因組DNA的提取與純化 95
實驗十 PCR技術(shù)擴增大鼠Crybb2基因 97
實驗十一 DNA瓊脂糖凝膠電泳 99
實驗十二 果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制備與觀察 101
實驗十三 人外周血淋巴細胞染色體標(biāo)本制備 104
實驗十四 人染色體G顯帶技術(shù)及G顯帶核型分析 106
第三篇 綜合性實驗
實驗十五 兔肝組織細胞核和線粒體的分級分離 108
實驗十六 氧化應(yīng)激誘導(dǎo)PC12細胞凋亡 111
實驗十七 血清蛋白的分離純化與鑒定 114
實驗十八 兔肝堿性磷酸酶的提取純化與比活性測定 118
實驗十九 堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定 125
實驗二十 激素對血糖水平的調(diào)節(jié)作用 128
實驗二十一 煙酸衍生物對血脂的影響 132
實驗二十二 四氯化碳致急性肝損傷的組織學(xué)與肝功能檢測 137
實驗二十三 質(zhì)粒的堿裂解法制備及電泳檢測 141
實驗二十四 大鼠β-晶體蛋白B2在大腸埃希菌中的誘導(dǎo)表達 145
實驗二十五 Southern Blot技術(shù)檢測人膠質(zhì)瘤細胞EGFR基因的擴增 147
實驗二十六 Northern Blot技術(shù)檢測大鼠HIF-1α mRNA表達 152
實驗二十七 Myc-PSD-95-PDZ1融合蛋白在HEK293細胞中的表達 155
實驗二十八 利用定點突變技術(shù)構(gòu)建活化型n-Src的重組質(zhì)粒 159
實驗二十九 環(huán)磷酰胺對小鼠骨髓嗜多染紅細胞的毒性作用 164
實驗三十 人乳腺癌組織中ERBB2基因擴增的檢測 166
實驗三十一 人基因性別的鑒定 169
實驗三十二 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成脂成骨的定向誘導(dǎo)分化 172
第四篇 探究性實驗
例1 腦缺血再灌注格爾德霉素神經(jīng)保護作用的機制研究 175
例2 EZH2對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成脂成骨分化的影響 177
附錄 181