生命是一個復(fù)雜的過程,“DNA-RNA-蛋白質(zhì)”這一中心法則不能解釋所有生命現(xiàn)象。表觀遺傳學(xué)是在這些例外的基礎(chǔ)之上發(fā)展而成的,是基于非基因序列改變所致基因表達(dá)水平變化,如DNA甲基化和染色質(zhì)重塑等。表觀遺傳學(xué)已經(jīng)部分顛覆了我們對生物結(jié)構(gòu)和行為方式的理解!侗碛^遺傳學(xué)技術(shù)前沿》共分為七篇,主要內(nèi)容涵蓋DNA甲基化、組蛋自修飾、miRNA調(diào)控研究前沿和實驗技術(shù)。在主要闡述了表觀遺傳學(xué)的基本知識的基礎(chǔ)上,結(jié)合本領(lǐng)域國內(nèi)外新科研成果,系統(tǒng)總結(jié)介紹了當(dāng)前表觀遺傳學(xué)領(lǐng)域的前沿進(jìn)展和新研究方法。
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目錄
第一篇表觀遺傳學(xué)概述及分析方法
第一章表觀遺傳學(xué)概述1
第二章DNA甲基化分析方法8
第三章組蛋白修飾分析方法15
第四章非編碼RNA相關(guān)分析方法19
第二篇基因表達(dá)檢測
第五章基因表達(dá)檢測概述26
第六章基因表達(dá)檢測方法27
第一節(jié)RT-PCR技術(shù)27
第二節(jié)熒光定量PCR技術(shù)29
第三節(jié)原位雜交技術(shù)35
第四節(jié)定點突變技術(shù)41
第五節(jié)基因芯片43
第六節(jié)啟動子區(qū)活性分析50
第三篇miRNA檢測技術(shù)
第七章miRNA概述52
第八章miRNA檢測技術(shù)概述56
第一節(jié)生物信息學(xué)56
第二節(jié)miRNA芯片技術(shù)59
第三節(jié)熒光定量PCR技術(shù)檢測miRNA62
第四節(jié)熒光素酶活性檢測技術(shù)68
第九章miRNA分析的應(yīng)用70
第四篇蛋白質(zhì)檢測技術(shù)
第十章蛋白檢測概述82
第十一章蛋白檢測技術(shù)概要87
第一節(jié)蛋白芯片技術(shù)87
第二節(jié)蛋白印跡技術(shù)91
第三節(jié)免疫熒光技術(shù)95
第四節(jié)免疫組化技術(shù)100
第五節(jié)ELISA技術(shù)103
第六節(jié)激光共聚焦技術(shù)115
第五篇DNA甲基化與組蛋白修飾檢測
第十二章DNA甲基化與組蛋白修飾概述119
第十三章DNA甲基化與組蛋白修飾方法概述136
第一節(jié)生物信息學(xué)分析136
第二節(jié)DNA甲基化檢測——MSP法138
第三節(jié)DNA甲基化檢測——焦磷酸測序法141
第四節(jié)DNA甲基化檢測——DNA甲基化芯片技術(shù)145
第五節(jié)DNA甲基化檢測——質(zhì)譜技術(shù)147
第六節(jié)組蛋白甲基化檢測150
第七節(jié)組蛋白乙酰化檢測155
第八節(jié)組蛋白糖基化檢測158
第九節(jié)組蛋白泛素化檢測162
第十節(jié)組蛋白甲基化和組蛋白乙;稽c特異性分析163
第六篇基因與蛋白相互作用檢測
第十四章基因與蛋白相互作用檢測概述166
第十五章基因與蛋白相互作用檢測方法概述167
第一節(jié)生物信息學(xué)時代167
第二節(jié)ChIP技術(shù)172
第三節(jié)DNaseⅠ足跡實驗180
第四節(jié)甲基化干擾試驗181
第五節(jié)電泳遷移率變動實驗182
第六節(jié)Southern印跡雜交185
第七節(jié)表面等離子共振189
第八節(jié)酵母單雜交系統(tǒng)194
第九節(jié)噬菌體展示技術(shù)198
第十節(jié)核酸適體技術(shù)207
第十一節(jié)拉下實驗219
第七篇蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用
第十六章蛋白與蛋白相互作用概述221
第十七章蛋白與蛋白相互作用檢測方法概述229
第一節(jié)生物信息學(xué)軟件預(yù)測237
第二節(jié)染色質(zhì)免疫共沉淀242
第三節(jié)印跡疊加或Far-Western印跡245
第四節(jié)GST融合蛋白純化技術(shù)245
第五節(jié)羥基蛋白質(zhì)足跡法249
第六節(jié)細(xì)菌雙雜交系統(tǒng)252
第七節(jié)酵母雙雜交技術(shù)255
第十八章蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用應(yīng)用259
參考文獻(xiàn)260