目錄
第一章生物化學(xué)常用分析技術(shù)1
第一節(jié)生物大分子的基本制備技術(shù)1
第二節(jié)分光光度法6
第三節(jié)層析技術(shù)15
第四節(jié)電泳技術(shù)24
第二章蛋白質(zhì)分子組成與理化性質(zhì)分析37
第一節(jié)蛋白質(zhì)的分子組成與結(jié)構(gòu)37
第二節(jié)蛋白質(zhì)的分離和純化38
第三節(jié)蛋白質(zhì)的定量38
第四節(jié)蛋白質(zhì)相對(duì)分子量測(cè)定41
第五節(jié)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目42
實(shí)驗(yàn)一蛋白質(zhì)的定量測(cè)定42
實(shí)驗(yàn)二血清蛋白質(zhì)的層析分離45
實(shí)驗(yàn)三血清蛋白質(zhì)的電泳分離48
實(shí)驗(yàn)四蛋白質(zhì)理化性質(zhì)分析52
實(shí)驗(yàn)五固定化蛋白質(zhì)的免疫生化鑒定（Western Blot）56
第三章核酸的分子組成及理化性質(zhì)分析58
第一節(jié)核酸的分子組成與結(jié)構(gòu)58
第二節(jié)核酸的理化性質(zhì)59
第三節(jié)核酸的制備和含量測(cè)定60
第四節(jié)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目61
實(shí)驗(yàn)六真核生物基因組DNA的制備（苯酚法）61
實(shí)驗(yàn)七人外周血白細(xì)胞DNA的制備62
實(shí)驗(yàn)八DNA與RNA含量測(cè)定63
實(shí)驗(yàn)九瓊脂糖凝膠電泳分離DNA63
第四章酶作用及酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)65
第一節(jié)酶的分子結(jié)構(gòu)和功能65
第二節(jié)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)65
第三節(jié)酶活性測(cè)定69
第四節(jié)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目70
實(shí)驗(yàn)十淀粉酶的特異性及溫度、pH對(duì)淀粉酶活性的影響70
實(shí)驗(yàn)十一堿性磷酸酶的提純及比活性的測(cè)定73
實(shí)驗(yàn)十二堿性磷酸酶的Km測(cè)定77
實(shí)驗(yàn)十三磷酸鹽對(duì)堿性磷酸酶的抑制作用78
實(shí)驗(yàn)十四溫度和pH對(duì)堿性磷酸酶活性的影響79
實(shí)驗(yàn)十五乳酸脫氫酶同工酶分析81
第五章物質(zhì)代謝及其激素調(diào)節(jié)83
第一節(jié)物質(zhì)代謝定義83
第二節(jié)物質(zhì)代謝的研究方法83
第三節(jié)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目85
實(shí)驗(yàn)十六血清葡萄糖的測(cè)定85
實(shí)驗(yàn)十七胰島素和腎上腺素對(duì)血糖濃度的影響87
實(shí)驗(yàn)十八肝糖原的提取和鑒定89
實(shí)驗(yàn)十九生物氧化中酶的催化作用90
實(shí)驗(yàn)二十血漿高密度脂蛋白-膽固醇含量的測(cè)定92
實(shí)驗(yàn)二十一磷脂的提取及其薄板層析94
實(shí)驗(yàn)二十二酮體的生成與作用95
實(shí)驗(yàn)二十三血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性的測(cè)定（改良賴氏法）97
實(shí)驗(yàn)二十四紙層析法鑒定轉(zhuǎn)氨酶的轉(zhuǎn)氨基作用99
第六章分子生物學(xué)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)102
第一節(jié)基因工程基本技術(shù)102
第二節(jié)聚合酶鏈反應(yīng)108
第三節(jié)核酸分子雜交111
第四節(jié)DNA測(cè)序技術(shù)113
第五節(jié)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目115
實(shí)驗(yàn)二十五動(dòng)物組織總RNA的提取115
實(shí)驗(yàn)二十六聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)體外擴(kuò)增DNA116
實(shí)驗(yàn)二十七逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）117
實(shí)驗(yàn)二十八 質(zhì)粒DNA的制備118
實(shí)驗(yàn)二十九限制性內(nèi)切酶酶切122
實(shí)驗(yàn)三十目的DNA片段的分離和純化123
實(shí)驗(yàn)三十一DNA片段與載體的連接124
實(shí)驗(yàn)三十二感受態(tài)細(xì)菌的制備（化學(xué)法）126
實(shí)驗(yàn)三十三質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化127
實(shí)驗(yàn)三十四重組質(zhì)粒的篩選128
實(shí)驗(yàn)三十五Southern blot（印跡）129
實(shí)驗(yàn)三十六外源基因的原核表達(dá)131
實(shí)驗(yàn)三十七外源基因在真核生物中的表達(dá)132
附錄134
附錄一常用緩沖溶液的配制134
附錄二常用蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量及等電點(diǎn)137
附錄三色譜法常用數(shù)據(jù)139
附錄四離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心力的換算141
附錄五實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)處理142