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內(nèi) 容簡介

分子克隆技術(shù)30多年來一直是全球生命科學領(lǐng)域?qū)嶒炇覍I(yè)技術(shù)的基礎(chǔ)。冷泉港實驗室出版的《分子克隆實驗指南》一書擁有的可靠性和*性，使本書成為業(yè)內(nèi)*流行、*具影響力的實驗室操作指南。第四版的《分子克隆實驗指南》保留了之前版本中備受贊譽的細節(jié)和準確性，10個原有的核心章節(jié)經(jīng)過更新，反映了標準技術(shù)的發(fā)展和創(chuàng)新，并介紹了一些前沿的操作步驟。同時還修訂了第三版中的核心章節(jié)，以突出現(xiàn)有的核酸制備和克隆、基因轉(zhuǎn)移及表達分析的策略和方法，并增加了12個新章節(jié)，專門介紹*激動人心的研究策略，包括利用 DNA 甲基化技術(shù)和染色質(zhì)免疫沉淀的表觀遺傳學分析、RNAi、新一代測序技術(shù)，以及如何處理數(shù)據(jù)生成和分析的生物信息學，例如介紹了分析工具的使用，如何比較基因和蛋白質(zhì)的序列，鑒定多個基因的常見表達模式等。本書還保留了必不可少的附錄：包括試劑和緩沖液、常用技術(shù)、檢測系統(tǒng)、一般安全原則和危險材料。任何使用分子生物學技術(shù)的基礎(chǔ)研究實驗室都將因擁有一冊《分子克隆實驗指南》而受益。本書可作為學習遺傳學、分子細胞生物學、發(fā)育生物學、微生物學、神經(jīng)科學和免疫學等學科的重要指導，可供生物學、醫(yī)藥衛(wèi)生，以及農(nóng)、林、牧、漁、檢驗檢疫等方面的科研、教學與技術(shù)人員參考。

Originally published in English as Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Fourth Edition, by MichaelR.Green and Joseph Sambrook 2012 Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork, USA 2017 Science Press. Print in China.Authorized Simplified Chinese translation of the English edition 2012 Cold Spring Harbor LaboratoryPress. This translation is published and sold by permission of Cold Spring Harbor Laboratory Press, the owner of all rights to publish and sell the same.

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第四版前言

人類和模式生物全基因組序列的獲得對各領(lǐng)域生物學家現(xiàn)有的科研方式產(chǎn)生了深遠影響。對浩瀚的基因圖譜的探索需要開發(fā)多種新的實驗技術(shù)和方法，傳統(tǒng)的克隆手冊必然會過時，已建立的方法也會被淘汰，這都是《分子克隆實驗指南》一書全新版本問世的主要推動力。在準備《分子克隆實驗指南》（第四版）的初期，我們進行了全面的回顧來決定哪些舊材料應(yīng)被保留，哪些新材料需要補充，難的是，哪些材料應(yīng)該被刪除。在回顧過程中，許多科學家提出了寶貴的建議，他們的名字在下一頁的致謝中列出，我們對他們深表感激。僅是一本實驗室手冊當然不可能涵蓋所有的分子生物學實驗方法，所以必須從中做出選擇，有時是艱難的選擇。我們猜測對于其中一部分選擇，有些人會提出異議。然而我們的兩個指導原則是：第一，《分子克隆實驗指南》是以核酸為中心的實驗室手冊，因而總體上我們沒有選取非直接涉及 DNA或 RNA的實驗方法。所以，盡管本書中有分析蛋白質(zhì)之間相互作用的酵母雙雜交實驗操作的章節(jié)，但并不包括許多其他的不直接涉及核酸的蛋白質(zhì)間相互作用研究方法。第二，本著 John Lockean為盡可能多的人們做多的善事的思想，我們嘗試囊括盡可能多的廣泛用于分子和細胞實驗室的以核酸為基礎(chǔ)的方法。對我們而言，較為困難的任務(wù)是決定哪些材料應(yīng)該被刪除，而這個任務(wù)在與冷泉港實驗室出版社協(xié)商之后難度大大降低，他們同意把較陳舊的方法放在冷泉港方案網(wǎng)站上

（www.cshprotocols.org），方便大家免費獲取。

由于新實驗方法的激增，由一個人（甚至兩個人）*撰寫所有相關(guān)的實驗方法是根本不現(xiàn)實的。因此，與前一版《分子克隆》大的不同是組織了眾多領(lǐng)域內(nèi)的專家們來撰寫指定章節(jié)，提供指定方案。沒有他們這些科學家的熱心參與，本書不可能呈獻給大家。自第三版《分子克隆實驗指南》后，各種商業(yè)化試劑盒層出不窮，這是一把雙刃劍。一方面，試劑盒提供了極大的便利，尤其用于個別實驗室非常規(guī)的實驗操作；另一方面，試劑盒可能經(jīng)常太過便利，使得使用者在進行實驗時并不理解方法背后的原理。我們提供商業(yè)化試劑盒列表，并描述它們?nèi)绾喂ぷ�，嘗試解決這一矛盾。許多人對《分子克隆實驗指南》（第四版）的出版發(fā)揮著重要的作用，我們對他們表示由衷的感謝。Ann Boyle幫助《分子克隆實驗指南》（第四版）起步，在項目早期也承擔了

關(guān)鍵的組織角色，后來，她的任務(wù)由其得力助手 Alex Gann接手。Sara Deibler在《分子克隆實驗指南》（第四版）所有時期的各個方面都做出了貢獻，尤其是協(xié)助撰寫、編輯和校對。

Monica Aalani對第 9章的內(nèi)容和撰寫做出了極大的貢獻。我們特別感謝冷泉港實驗室出版社員工的熱情支持以及卓越合作和包容，尤其是JanArgentine，她負責整個項目并把關(guān)財務(wù)。感謝我們的項目經(jīng)理 Maryliz Dickerson、項目編輯Kaaren Janssen、Judy Cuddihy和Michael Zierler，制作經(jīng)理Denise Weiss，制作編輯KathleenBubbeo，當然還有冷泉港實驗室出版社的幕后智囊 John Inglis。Michael R. Green

Joseph Sambrook

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